脂肪肝动物模型
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详细内容
脂肪肝动物模型
原理
肝脏是脂质代谢的中心器官。在生理状态下,肝脏通过摄取从食物中吸收以及由乳糜微粒或脂肪细胞释放入血的FFA,用于合成TG、TC及磷脂和糖脂,这些合成脂与特异的载脂蛋白结合而被分泌入血浆,当来源于饮食或从脂肪组织中动员的FFA急剧增加,超过了肝脏脂质代谢动力循环平衡,则脂肪在肝细胞内开始大量堆积而形成脂肪肝。本脂肪肝模型即通过长期喂食高脂饲料所致。高脂饲料是指在基础饲料中加入一定比例的脂肪类食物,如5%-20%猪油、1%-10%胆固醇、5%-15%蛋黄粉等。为了促使病变的形成,在高脂饲料中还可添加胆酸钠或富含不饱和脂肪酸的物质如玉米油、鱼油等,后者尚易诱致脂肪肝伴炎症和纤维化。本模型动物通常选用大鼠和家兔。模型大鼠在采用高脂饲料持续饲养2-4周时可出现高脂血症,8-12周后肝脏呈中-重度大泡性脂肪变伴转氨酶升高应用大鼠建立脂肪肝模型,有饲养方便、抵抗力强、食性与人类相近、模型复制成功率高等优点。
特点
模型大鼠血清TC、TG、FFA、AST、ALT升高,肝组织TC、TG、FFA含量增加,AOX表达增高;肝脏全小叶脂肪变性,属大囊泡性,并有大囊泡融合形成的脂囊;脂变肝细胞以中央静脉周围*明显;100%存在小叶内炎症,以单核细胞、淋巴细胞浸润为主,并可见点状、灶状、碎屑样坏死。模型家兔肝脏肿胀,表面呈黄白色,油腻,肝组织有变性(颗粒变性或嗜酸性变)和坏死(溶解及点样坏死)呈局灶分布并伴淋巴细胞浸润,并可见细胞质内充满大量大小不等的圆形脂滴;肝小叶排列紊乱、边界不清,但未形成假小叶;肝索结构紊乱,纤维组织轻度增生,肝窦和中央静脉间有红细胞堆积。
方法
成年大鼠,每日喂养含2%胆固醇、10%猪油、0.3%胆酸钠等成分的高脂饲料,连续8周,或成年家兔,每日喂食含1%胆固醇、10%猪油的高脂饲料40g/kg体重和高胆固醇饲料80mg/kg体重,连续12周。造模毕,立即抽取全血及摘取肝组织,测定血中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、游离脂肪酸(FFA)、极低密度脂蛋白(VLDL)、碱性磷酸酶(ALP)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)及肝组织中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、游离脂肪酸(FFA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)的含量,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定肝组织中酞基辅酶A氧化酶(AOX)的表达,并对肝脏作组织形态学检查。
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