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Lumiprobe/艾美捷-抗体标记试剂盒
点击次数:0发布时间:2022/1/19 17:36:05
更新日期:2022/1/19 17:36:05
所 在 地:中国大陆
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详细内容
Lumiprobe
Lumiprobe 业提供分子生物学研究用的活性荧光染料。覆盖域有:活性染料(ReactiveDye)和SYBRGreen I染料,定制合成荧光双标记引物。主要应用:点击化学(CLickChemistry)、蛋白质组学研究中的双向荧光差异凝胶电泳(2DDIGE)和实时荧光定量PCR(ReaLtimePCR)。
接下来给大家介绍下Lumiprobe /艾美捷 抗体标记试剂盒的相关内容:
1.抗体制备
标记反应的佳条件如下:浓度为1 mg/mL的抗体溶解在0.1 M碳酸氢钠溶液中。叠氮化钠与标签相容。如果抗体浓度低于1 mg/mL,则应进行浓缩。抗体制备应不含氨基酸、蛋白质(如BSA)和缓冲成分,这些成分会使pH值处于不利(2-7.5或9-12)范围。
2.建立反应
2.1. 向荧光团、旋涡中添加碳酸氢钠抗体溶液(100微克/100微升*),并在室温下培养30分钟。
*如果要标记少量抗体,将冻干染料溶解在10微升无水二甲基亚砜中,每10微克抗体取1微升溶液。应立即消耗DMSO中的染料溶液。
3.标记抗体的纯化
3.1. 准备栏。使用,色谱柱应在室温下。应使用漩涡重新悬浮凝胶。将色谱柱放入废物容器(无盖),并在1000 g下离心2分钟(必须小心控制速度-对于标准6 cm转子,1000 g=3800 rpm)。立柱的小凸起应朝外。
3.2. 应用400微升1x PBS缓冲液,以1000 g离心2分钟。
3.3. 从废物容器上拆下柱。将其放入收集管(带盖)。将100微升反应混合物施加到柱上,培养1分钟,并通过离心以1000 g的速度洗脱抗体2分钟。添加1/100体积的100倍叠氮化钠。抗体可以等分以提高其保存期。当等分试样可储存在+4°С的温度下,其余等分试样可储存在+4°С的温度下−20 °С.
4.染料与抗体比率的测量
为了计算染料与抗体的比率,测量共轭物的吸收光谱,或在280 nm(AAB)和染料吸收大值(ADye)处的吸收。染料标记抗体的典型吸收光谱如下所示。根据染料的不同,大波长可能会有所不同。
Lumiprobe 部分研究工具:
cat# 名称 规格
11030 Cy3 azide 100ul
12030 Cy3.5 azide 100ul
13030 Cy5 azide 100ul
14030 Cy5.5 azide 100ul
14130 FAM azide,5-isomer, 100ul
11130 JOE azide,5-isomer 100ul
14230 R110 azide,5-isomer 100ul
12230 ROX azide,6-isomer 100ul
17130 TAMRA azide, 5-isomer 100ul
33720 Azidobutyric acid NHS ester 100ul
艾美捷科技是Lumiprobe 的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。