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G-Biosciences丨SAM510™:SAM 甲基转移酶检测方案
点击次数:0发布时间:2022/7/14 16:09:12
更新日期:2022/7/14 16:09:12
所 在 地:中国大陆
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关键生物分子和蛋白质的甲基化在许多生物系统中发挥着重要作用,包括信号转导、生物合成、蛋白质修复、基因沉默和染色质调节 (1)。
S-腺苷甲硫氨酸 (SAM) 依赖性甲基转移酶使用 SAM,它是仅次于 ATP 的第二个J常用的酶辅助因子。SAM,也称为 AdoMet,充当修饰蛋白质和 DNA 所需的甲基的供体。SAM 的异常水平与许多异常有关,包括阿尔茨海默氏症、抑郁症、帕金森氏症、多发性硬化症、肝功能衰竭和癌症 (2)。
艾美捷 G-Biosciences 的 SAM 甲基转移酶测定是连续的酶偶联测定,可以连续监测 SAM 依赖性甲基转移酶 (3),而无需使用放射性标记或终点测量。种敏感的、基于紫外线的、SAM265, 和比色法,SAM510, 提供 SAM 甲基转移酶检测。这荧光的SAM fluoro:SAM 甲基转移酶检测也可用。
艾美捷G-Biosciences SAM510™: SAM 甲基转移酶测定是种连续动力学酶偶联测定,可以连续监测纯化的 SAM 依赖性甲基转移酶,而无需使用放射性标记或终点测量。这是种用于蛋白质 SAM 甲基转移酶的灵敏酶联测定法。
关键生物分子和蛋白质的甲基化在许多生物系统中发挥着重要作用,包括信号转导、生物合成、蛋白质修复、基因沉默和染色质调节。
S-腺苷甲硫氨酸 (SAM) 依赖性甲基转移酶使用 SAM,它是仅次于 ATP 的第二个常用的酶辅助因子。SAM,也称为 AdoMet,充当修饰蛋白质和 DNA 所需的甲基的供体。SAM 的异常水平与许多异常有关,包括阿尔茨海默氏症、抑郁症、帕金森氏症、多发性硬化症、肝功能衰竭和癌症。
基本上,从 SAM 中去除甲基会产生 S-腺苷高半胱氨酸,其通过所包含的腺苷高半胱氨酸核苷酶迅速转化为 S-核糖高半胱氨酸和腺嘌呤。这种快速转化防止了腺苷同型半胱氨酸的积累及其对甲基化反应的反馈抑制。后,腺嘌呤通过腺嘌呤脱氨酶转化为次黄嘌呤,然后再转化为尿酸盐和过氧化氢。过氧化氢的产生速率用比色测定法通过在 510nm 处吸光度的增加来测量。
由于腺苷高半胱氨酸核苷酶的特异性,该测定可适用于任何纯化的 SAM 依赖性甲基转移酶或产生 5-腺苷高半胱氨酸或 5'-甲基硫腺苷的纯化酶。该试剂盒提供了足够用于 100 x 115µl 微孔检测的试剂。
艾美捷G-Biosciences SAM510™: SAM 甲基转移酶测定特征:
纯化甲基转移酶的动力学分析或筛选甲基化抑制剂。
用于动力学研究的连续酶偶联测定。
比色、非放射性测定。
随附所有试剂,包括阳性对照。
适用于产生 S-腺苷高半胱氨酸或 5'-甲基硫腺苷的酶。
艾美捷G-Biosciences SAM510™: SAM 甲基转移酶测定应用:
用于蛋白质 SAM 甲基转移酶的动力学分析。
筛选甲基转移酶抑制剂的理想选择。
参考文献:
1. Cheng, X. & Blumenthal, R.M. (1999) S-Adenosylmethionine Dependent Methyltransferases World Scientific, Singapore.
2. Schubert, H.L. et al. (2003) Trends Biochem. Sci 28: 329-335.
3. Dorgan, K.M. et al. (2006) Anal. Biochem. 350:249-255.
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