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Worthington优化技术:细胞定量
点击次数:0发布时间:2022/7/29 15:34:07
更新日期:2022/7/29 15:34:07
所 在 地:中国大陆
产品型号:
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详细内容
为了有效地评估每个程序,量化每个解离步骤的结果非常重要。建议使用细胞计数室(血细胞计数器)进行产量定量,并使用台盼蓝进行活力定量。概述了使用血细胞计数器进行细胞产量定量;但是,此程序的新手可以参考更详细的讨论(参见 Freshney,动物细胞培养,第 227 页)。
艾美捷Worthington优化技术所需用品:
改进的 Neubauer 血细胞计数器
细胞兼容培养基或 BSS
巴斯德移液器或微量移液器
显微镜 (10X)
柜台
艾美捷Worthington细胞定量程序:
1.用 70% 异丙醇仔细清洁计数室表面和血细胞计的盖玻片,并使其风干。小心不要刮伤这些表面。
2.用试剂水润湿盖玻片的侧面,并将盖玻片对准计数室。
3.使用巴斯德移液器或微量移液器取充分混合的 20-50 µl 等分的解离细胞悬液,仅将细胞吸入尖端。通过将移液器的尖端放在腔室边缘并让腔室通过毛细作用完全充满,立即将细胞悬浮液转移到计数室。不要过度或不足填充腔室。
4.对血细胞计数器另侧的第二个腔室使用另个等分样品重复此过程。
5.将血细胞计数器放在显微镜台上,并使用计数插图10X 物镜,注于计数室网格线。根据需要调整对比度以清楚地看到网格和分散的单元格。
6.通过缓慢移动滑块来调整字段区域,以获得由三条线包围的中心网格。计算此 1 mm 2区域中存在的单元格总数,包括位于顶部和左侧边界上的单元格,不包括位于右侧和底部边界上的单元格。
7.为了准确计数至少 100-500 个细胞。根据产量和密度,可以计算更多或更少的面积。
8.重复第二个室的计数。如果不存在第二个腔室,则应清洁载玻片并重复该过程。
注:Worthington 的组织解离酶可互换用于所引用的大多数制剂。
Worthington核心酶:包括:胶原蛋白酶,脱氧核糖核酸酶I,弹性蛋白酶,木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,胰蛋白酶等。
Worthington主要研究覆盖生物技术和生命科学研究,诊断,生物制药和生物加工应用的高质量纯化酶,蛋白质,核酸和试剂盒。艾美捷科技是Worthington的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。