为了研究增加酶浓度对反应速率的影响，底物必须过量存在；即，反应必须与底物浓度无关。在特定时间段内形成的产品量的任何变化将取决于存在的酶水平。从图形上看，这可以表示为（图1）：

这些反应被称为“零”，因为速率与底物浓度无关，并且等于某个常数 k。产物的形成以与时间成线性的速率进行。添加更多的底物不会提高速率。在零动力学中，允许测定运行双倍时间会导致产物量翻倍（图2）。

反应中存在的酶量是通过它催化的活性来衡量的。活性和浓度之间的关系受到许多因素的影响，例如温度、pH 等。必须设计酶测定法，以便观察到的活性与存在的酶量成比例，以便酶浓度是的限制因素。只有当反应为零时才满足。

艾美捷worthington影响酶活性的因素说明：

在图 3中，活动与区域 AB 中的浓度成正比，但在 BC 中不成正比。当底物浓度不受限制时，酶活性通常大。当酶促反应产物的浓度与时间作图时，会得到类似的曲线，图4。

在 A 和 B 之间，曲线代表零反应；也就是说，速率随时间恒定的种。随着底物用完，酶的活性位点不再饱和，底物浓度变为限速，反应变为 B 和 C 之间的反应。

为了理想地测量酶活性，必须在反应为零的曲线部分进行测量。个反应初很可能是零的，因为此时底物浓度高。为了确定反应是零的，必须对产物（或底物）浓度进行多次测量。

图 5 说明了酶分析中可能遇到的三种类型的反应，并显示了如果只进行单次测量可能会遇到的问题。

B是代表零反应的直线，它允许准确测定部分或全部反应时间的酶活性。A 代表图 4 中所示的反应类型。该反应初是零，然后变慢，可能是由于底物耗尽或产物抑制。这种类型的反应有时被称为“引导”反应。真正的“潜在”活动由虚线表示。曲线 C 表示具有初始“滞后”阶段的反应。虚线再次代表潜在可测量的活动。产品浓度的多次测定可以绘制每条曲线并确定真实活性。

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