·方法和材料

·使用酶

·基本原代细胞分离

·95%O 2 :5%CO 2平衡

·研磨

·酶促细胞收获

·细胞粘附和收获

·用于细胞收获的胰蛋白酶

·细胞释放程序

接下来起来看看worthington组织解离的方法和材料：用 95% O ₂ :5% CO ₂平衡。

在许多细胞分离程序中，对于解离过程中组织的存活来说，培养介质在生理 pH 值下既要充氧又要缓冲是很重要的。当培养基与 95%O ₂ :5%CO ₂平衡时，这两个要求都得到了满足。几种平衡盐溶液含有对 pH 值敏感的指示剂染料酚红。当它呈红色或紫色时，介质太碱性。当将组织置于解离酶溶液中时，有时会发生这种情况。孵育通常需要用 O ₂ :CO ₂重新平衡。

气体不应直接鼓入任何含有蛋白质的溶液中。这会导致蛋白质起泡和变性，失去生物活性。气体可通过 0.22 微米膜过滤器或通过无菌纤维塞（例如无菌巴斯德或容量移液管中的棉塞）进行消毒。在混合溶液的同时，使O ₂ :CO ₂连续通过液体上方的空间，直到颜色指示 pH 值为 7.2-7.4。平衡盐溶液通常预先充气，但每次打开瓶子时都应使用无菌O ₂ :CO ₂进行平衡。

无论氧化/碳酸化程度如何，缓冲平衡盐溶液通常会保持恒定的 pH 值，因此更容易使用。某些细胞类型可能对特定的缓冲盐敏感。参考表可用于为特定应用选择合适的平衡盐溶液、缓冲液或解离介质。

艾美捷worthington组织表（参考，按组织类型和物种分组） 

脂肪/脂肪 肾上腺 骨 脑

软骨 冒号 内皮 上皮

眼睛 心 肠 肾

肝 肺 淋巴结 乳腺

各种各样的 肌肉 神经 胰腺

腮腺 垂体 列腺 生殖

秤 皮肤 脾 干

胸腺 甲状腺/甲状旁腺 扁桃体 瘤

注意：Worthington并未将列出的参考文献仅限于那些使用 Worthington 酶的论文。般而言，Worthington 提供的组织解离酶可互换用于所引用的大多数制剂。

Worthington注于高质量纯化酶，蛋白质，核酸和试剂盒。其核心酶产品包括：胶原蛋白酶，脱氧核糖核酸酶I，弹性蛋白酶，木瓜蛋白酶，核糖核酸酶，胰蛋白酶等。艾美捷科技是Worthington的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源:https://www.amyjet.com/brand/Worthington.shtml