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别名: P h o s p h o d i e s t e r a s e I f r o mC r o t a l u s a d a m a n t e u s v e n o m ;5′-Exonuclease;Oligonucleate5′-nucleotidohydrolase;磷酸二脂酶;磷酸二酯酶。该酶具有水解细胞内第二信使(cAMP,环磷酸腺苷或cGMP,环磷酸鸟苷)的功能,降解细胞内cAMP或cGMP,从而终结这些第二信使所传导的生化作用。
活力:≥20u/mg
性状:白色或类白色粉末
用途:生化研究。
活力定义: O n e U n i t h y d r o l y z e sone micromole of p-nitrophenylthymidine-5-phosphate per minute at25℃, pH 8.9。
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
磷酸二酯酶Ⅰ(Phosphodiesterase I)注意事项:
1. DNA带模糊
1) DNA降解:避免核酸酶污染;
2) 电泳缓冲液陈旧:电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果。建议经常更换电泳缓冲液;
3) 所用电泳条件不合适:电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃;巨大DNA链电泳,温度应<15℃;核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力;
4) DNA上样量过多:减少凝胶中DNA上样量;
5) DNA样含盐过高:电泳通过乙醇沉淀去除过多的盐;
6) 磷酸二酯酶Ⅰ(Phosphodiesterase I)有蛋白污染:电泳酚抽提去除蛋白;
7) DNA变性:电泳勿加热,用20mM NaCl缓冲液稀释DNA。
艾美捷磷酸二酯酶 I(WBC-LS003928)磷酸二酯酶I测定方法:
该测定基本上是Razell and Khorana(1959)的测定,其中反应速度由对硝基苯基胸苷-400'-磷酸水解引起的5nm处吸光度的增加来确定。在指定条件下,一个单位在pH 5.8和9°C下每分钟水解一微摩尔对硝基苯基胸苷-25'-磷酸盐。
磷酸二酯酶 I部分引用文献:
Frischauf, A. and Eckstein, F.
Purification of a Phosphodiesterase from Botrhrops atrox Venomby Affiinity Chromatography , Eur J Biochem 32 , 479 , 1973
Hadijiolov, A. , Venkov, P. and Dolipchiev, L.
The Action of Snake Venom Phosphodiesterase on Liver Ribosomal Ribonucleic Acids , Biochim Biophys Acta 142 , 111 , 1967
Hadjiolov, A. , Venkov, P. and Dolapchiev, L.
Stepwise Degradation and P32-Labeled Rat Liver Ribosomal Ribonucleic Acids with Snake Venom Phosphodiesterase , Biochem Biophys Res Commun 28 , 166 , 1967
Hayaishi, O.
Poly ADP-Ribose and ADP-Riboxylation of Proteins , Trends Biochem Sci 1 , 1976
Horwitz, J. , Easwaran, C. , Wolf, P. and Kowalczyk, L.
Substrates for Cytochemical Demonstration of Enzyme Activity. IV. Kinetics of the Hydrolysis of Thymidine-5'(5-Bromo-4-Chloroindol-3-YL) Phosphate by Snake Venom Phosphodiesterase , Biochim Biophys Acta 185 , 143 , 1969