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艾美捷CompTech丨人补体C3蛋白功能和测定

点击次数:0发布时间:2023/3/3 16:09:20

艾美捷CompTech丨人补体C3蛋白功能和测定

更新日期:2023/3/3 16:09:20

所 在 地:中国大陆

产品型号:

简单介绍:人类天然的C3是一种天然的糖基化 (~2.7%) 多肽,包含两条二硫键连接的链 。C3是补体激活的所有三种途径的激活的核心(Law,S。K.A.和里德,K。

相关标签:CompTech 

优质供应

详细内容

 艾美捷CompTech人补体C3蛋白:

 

名称: C3蛋白

编号: A113

规格: 250 µg/vial

浓度: 1.0 mg/mL (实际浓度见分析证书)

类型 冷冻液体

活动: >值为70%,与正常人血清标准相比 (见分析证书) 。

纯度: >95%由SDS-PAGE

缓冲区: 10 mM磷酸钠,145 mM氯化钠,pH 7.2

消缺系数。 A280 nm在1.0 mg/mL时的=为1.03

分子量: 185000Da (2链)

防腐剂: 无,0.22µm过滤

存储: - 7 0oC或以下。避免冻融 (>每次解冻活性损失10%) 。

根源 正常的人类血清 (经认证的HBsAg、HTLV-I/II、STS和HCV、 HIV1和HIV-II抗体检测均为阴性) 。

预防措施 在处理人体血液制品时要采取常规的预防措施。

 

般说明

人类然的C3是一种天然的糖基化 (~2.7%) 多肽,包含两条二硫键连接的链 C3是补体激活的所有三种途径的激活的核心(LawSK.A.和里德,K

B. M. (1995)).每个途径的起始都产生与目标表面结合的蛋白水解酶复合物 (C3转化酶 ) 。这些酶在C3中切割一个肽键,释放过敏性毒素C3a并激活C3b。在很短的一段时  (~60µs) ,这种新生的C3b能够与目标表面的羟基发生反应并共价偶联。碳水化合 是选的目标,但蛋白质的羟基和氨基也会发生反应。这种用C3b标记目标表面的过 程被为调理作用。新生C3b的反应位点是硫酯(Tack BJ.等人。 (1980); Pangburn M.K.和穆勒-EberhardHJ. (1980) ),C3b通过共价酯键与目标相连 (如果C3b附着 氨基,则形成酰胺键) 。大多数在补体激活过程中被激活的C3永远不会附着在表面 ,因它的硫酯与形成水的流体相C3b反应,而C3bH和形成iC3b的因子迅速失活。表 面结合的C3b在所有三个途径中对于有效激活C5和C5b-9复合物的形成都是必需的。 合的C3b及其分解产物iC3bC3d被淋巴细胞和吞噬细胞上的许多受体识别,这些 体使用C3b配体刺激抗原呈递给适应性免疫系统的细胞。终的结果是目标特异性胞和t细胞群体的扩大。

 

物理特性和结构

分子量18.5万道尔顿, 由两条二硫键连接的链组成。阿尔法链是110000道尔 顿 (包含C3aC3d域) ,测试链是75000道尔顿。阿尔法链和阿尔法链是通过一个二 连接起来的。C3的pI约为。5.9

C3C3转化酶切割后,C3a (77个氨基酸片段,9083 Da) 从alpha链的n端释 出来,C3b (176,000 Da) 变成


共价附着在活化剂表面的。C3和C3b的晶体衍生结构均已被描述(GrosP。  (2008) ) 这些结果表明,在C3aC3b肽键被裂解后,C3的C3b部分发生了很大的构象变化。

天然的C3和C4在血浆中循环,通过分子内硫酯键连接其C3dC4d结构域中  甘氨酸谷氨酰胺残基。这些硫酯键容易受到氨、 甲胺、羟胺和联胺等氨的亲零攻击 所有这些胺都已被用于灭活补体

血清

CAS号:80295-41-6

MDL号 :  MFCD00130836

C3对于有效的补体激活和随后的抗原呈现给适应性免疫系统的细胞至关重  (LambrisJD. (1988)).在识别目标补体后,被三种补体途径中的一种激活,并在 表面形成酶 (C3转化酶) 。这些酶 (C4bC2aC3bBb) 在阿尔法链的Arg 77后 C3,释放过敏性毒素C3a并将C3b沉积在目标表面。虽然有一个非常弱的C3旁路系 统通过典和凝集素途径运作 (C4bC2a可以在没有C3b的情况下激活C3b的102000)  C3b是有效C5激活所必需的(Rawal N。和潘伯恩MK. (2003)).

纯化的c3对冻融为敏感,在每个冻融循环中损失510%的活性。它对诸如-20 等中间温度也很敏感oC.它在中等温度下停留的时间越长,失去的活性就越多。几 oC可以完全灭活它,即使它仍然被完全冻结。

测定

补体活需要c3。因此,典型的C3功能检测在缺乏C3的系统中使用细胞裂解端 点,了来自被检测的来源。有三种基本的检测方法。1)抗体致敏的绵羊红细胞 (EA ) 可用于使用c3耗尽的人血清的ch50型检测。该方法的灵敏度约为50 ng C3。2) EA 和纯的成分C1、C4和C2可用于制造EAC142细胞,利用C3进行有效的C5激活和裂解  (DoddsAW.和SimRB. (1997)).该方法的灵敏度约为5 ng C3。3)另一种途径 方法可在5 mM MgEGTA存在下使用兔红细胞和c3耗尽的人血清。该方法的灵敏度 为200 ng C3。

HBsAgHTLV-I/IISTS以及HCVHIV1和HIV-II抗体的认证检测均为阴性

参考文献

Dodds, A.W. and Sim, R.B. editors (1997) Complement. A Practical Approach (ISBN

019963539) Oxford University Press, Oxford.

Ghannam A, et al. (2008) Human C3 deficiency associated with impairments in dendritic cell differentiation, memory B cells, and regulatory T cells. J Immunol. 1;181(7):5158-

66.

 

来源:https://www.amyjet.com/products/A113.shtml

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