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每个试剂盒足以对多达24个样品进行一式三份的分析,并包含一个96孔板GDF-15
标准品、生物素化检测抗体和链亲和素偶联的辣根过氧化物酶(HRP),以及
用于稀释样品和抗体以及用于板洗涤的缓冲液。
Cat #GDF-15M:用于小鼠/大鼠GDF-15/NAG-1/MIC-1的兔多克隆抗体
Cat #GDF-15:人GDF-15/NAG-1/MIC-1的山羊多克隆抗体
艾美捷Detroit R&D GDF-15癌症酶联免疫酶抑制剂试剂盒化验程序:
步骤1:将100微升样品稀释缓冲液装入空白(BL)孔中。
步骤2:将每种标准品100微升装入适当的井中。
步骤3:将100微升的每个样品装入适当的孔中。
步骤4将培养皿在室温下培养两个小时。
步骤5:每孔用400微升稀释的洗涤缓冲液洗涤平板三次。
第6步:在三次洗涤循环的后一次之后,将盘子拍干,放在纸巾上。
步骤7:将100微升检测抗体添加到除
BL井)。
步骤8:将平板在室温下培养2小时
步骤9:每孔用400微升稀释的洗涤缓冲液洗涤平板三次。
步骤10:将100微升的链霉亲和素HRP添加到除BL孔外的所有孔中
步骤11:将平板在室温下培养1小时
步骤12:每孔用400微升稀释的洗涤缓冲液洗涤平板三次。
步骤13:将200微升TMB添加到所有井中
步骤14:在室温下培养30分钟
步骤15:向所有井中加入50微升2N硫酸
步骤16:在450 nm处读取板
计算结果:
大多数读板器提供数据简化软件,可用于绘制标准曲线并确定样品浓度。如果您的读板器没有此选项,则可以使用数据缩减程序(4对数-对数曲线拟合的参数)。
如果您没有这些选项,可以按如下方式手动获取结果:
1.对空白处的吸光度读数进行平均,并从板的每个孔中减去该值,以获得校正后的读数。(注意:有些读板器会自动执行此操作。请参阅您的读板用户手册读者。)
2.平均每个标准品和空白品的校正吸光度读数。
3.通过绘制每个标准品(y轴)与标准品的平均净吸光度来创建标准曲线浓度(x轴;对数刻度)
4.使用回归分析生成的公式来计算未知样本的浓度。
5.将每个样品获得的浓度乘以其相应的稀释系数。
Detroit R&D注于心血管疾病、癌症的研究,诊断和治疗域。涉及环境健康科学、高血压、乳腺癌和列腺癌相关研究域。艾美捷科技是Detroit R&D的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。