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这些条件可能需要根据你的细胞、DNA、RNA等进行进一步的优化。
艾美捷OZ Biosciences PolyMag CRISPR试剂盒优化协议:
建议您优化转染条件,以充分利用磁转染ä. 可以优化几个参数:
•使用的核酸剂量
•PolyMag CRISPR与核酸的比例
•细胞密度
•培养时间
1.先优化PolyMag CRISPR/DNA的比例。为此,使用固定数量的DNA。变化PolyMag CRISPR的量为0.25至5m升/mg的DNA。PolyMag CRISPR/DNA的比例可以通过将所使用的试剂的体积加倍或相乘来改变。试剂可以是在去离子水中预先稀释。
2.此后,以固定比例的PolyMag CRISPR/DNA改变核酸剂量之进行了优化。为此,您可以对预成型的磁矢量复合体。
3.也可以研究每个质粒的化学计量:改变每个质粒的比例整个混合物中的DNA。
4.在确定了正确数量的PolyMag CRISPR和核酸后,您可以通过优化复合体的细胞数量和孵育时间来实现这一过程形成和用于磁场应用。