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Fluo-4 是 Fluo-3 的类似物,其中两个氯取代基被氟取代,这导致 488 nm 处的荧光激发增加,从而产生更高的荧光信号。Fluo-4 在 494 nm 处具有大吸收,因此可被氩离子激光激发。Fluo-4 在没有 Ca 2+存在的情况下基本上是非荧光的,但在 Ca 2+结合时荧光增加至少 100 倍。此外,由于 Fluo-4 比 fura-2 和 indo-1 更弱地结合 Ca 2+(更高的 Kd),因此它对于测量Ca 2+尖峰期间的高瞬时 Ca 2+浓度更有用。
艾美捷Fluo-4, AM ester#50018可用于通过荧光显微镜、流式细胞术或荧光酶标仪检测细胞内游离钙。
基于 BAPTA 的离子指示剂(如 Fluo-4)已被EDC/EDAC(目录号 59002)原位固定。指示染料的固定可用于下游免疫荧光和 IHC 研究 ( Cell Calcium 1997, 21(3), 175 )。
由于指示剂不与细胞成分共价结合,因此它可以通过有机阴离子转运蛋白主动从细胞中流出。流出速率随温度增加,并且可能因细胞类型而异,导致保留时间从几分钟到几小时不等。在细胞中使用指示剂的实验通常在加载后一到两个小时内进行,但如果需要,可以重新加载具有指示剂的细胞。有机阴离子转运蛋白抑制剂丙磺舒 (#50027)可用于减缓指示剂从细胞中流出的速度。
Fluo-4, AM ester相关参数:
可溶于DMSO的橙红色固体
-20°C 储存并避光,尤其是在溶液中时
λ Ex /λ Em(含 Ca 2+):494/506 nm(水解后)
缓冲液中 Ca 2+的K d:~335 nM(水解后)
C 51 H 50 F 2 N 2 O 23
分子量:1096.95
[273221-67-3]
Fluo-4, AM ester属性:
细胞渗透性:透膜剂
激发/发射:494/516 nm(水解后)
指标类型 :非比例
CAS号:273221-67-3