艾美捷 RBOHD |呼吸爆发氧化酶同源蛋白D应用案例：

从Col-0（野生型）和rbohd空突变体（Nühse et al.，2007）的10或12株7日龄拟南芥幼苗中分离出总蛋白。16µl总蛋白在65°C下变性5分钟，在8%SDS-PAGE上分离。并在55V电压下使用槽式传输系统传输70分钟至硝化纤维素膜。用1xPBS+0.1%吐温20+5%牛奶（PBS-T）或TBS+0.1%吐温20（TBS-T）+5%牛奶在室温（RT）下搅拌2小时阻断印迹。抗体按指示分别稀释至1:2500和1:5000，并在4℃下在1xPBS-T pr TBS-T+5%牛奶中搅拌培养。倾析抗体溶液，在RT条件下搅拌，在1xPBS-T或TBS-T中洗涤印迹3次（每次7分钟）。根据制造商的建议，将二抗体山羊抗兔HRP结合物（AS09 602，Agrisera）稀释至1:20000，并使用化学发光检测试剂对印迹进行培养。X射线胶片的曝光时间为2分钟。作为同膜的对照部分，用抗CNX1/2抗体（AS12 2365，Agrisera）孵育。

RBOHD丨呼吸爆发氧化酶同源蛋白D相关研究工具介绍：

1、针对参与氧化应激的蛋白质的抗体的收集

2、植物蛋白提取缓冲液

3、二抗体

参考资料：

Nühse等人。质膜蛋白的定量磷酸化蛋白质组分析揭示了植物天然免疫应答的调节机制。植物J。2007年9月；51(5): 931–940.

Nga Nguyen、Kelly Mason和Antje Heese（密苏里大学-哥伦比亚大学，密苏里州，美国）提供

Agrisera公司提供的植物域的抗体涵盖拟南芥、莱茵衣藻、蓝藻、松柏类、硅藻、大豆、大麦、蒺藜苜蓿、烟草、稻、菜豆、小立碗藓、杨树、豌豆、番茄、马铃薯、菠菜、小麦、玉米、葡萄等多个物种。艾美捷科技是Agrisera的中国代理商，为科研工作者提供优质的RBOHD丨呼吸爆发氧化酶同源蛋白D。