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尿酸酶丨Worthington猪肝尿酸酶的特征:

点击次数:0发布时间:2022/7/28 15:00:43

尿酸酶丨Worthington猪肝尿酸酶的特征:

更新日期:2022/7/28 15:00:43

所 在 地:中国大陆

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简单介绍:Worthington主要研究覆盖生物技术和生命科学研究,诊断,生物制药和生物加工应用的高质量纯化酶,蛋白质,核酸和试剂盒。

相关标签:Worthington 

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详细内容

 尿酸盐:O 2氧化还原酶

 

尿酸酶(尿酸氧化酶)催化以下整体反应:

 

Urate+O2+H2OAllantoin+H2O2+CO2

 

该反应代表除人类、高等猿和达尔马提亚犬之外的所有哺乳动物中嘌呤分解代谢的终止。

 

Mahler (1963) 对这种酶进行了综述。

 

尿酸酶对于生物体液中尿酸的测定非常重要。反应不仅具有特异性,还可以在 292 nm340 nm 或通过耦合显色响应进行比色监测。非酶促方法会受到混浊或存在阿司匹林、抗坏血酸、谷胱甘肽、扑热息痛和许多抗生素的干扰。参见 Itiaba等人。(1975);关等人。(1975);佩斯等人。(1974);Gökicke 和 Gökicke (1973);卡巴萨卡连等人。(1973);拉姆和甘比诺 (1973);斯蒂尔 (1970) 和特洛伊和珀迪 (1970)

  

 

艾美捷Worthington 猪肝尿酸酶的特征:

分子量:125,000 (Pitts et al . 1974)

组成:该酶由 32,000 MW 的四个亚基组成,每个分子 (125,000 MW) 有个铜原子 (Pitts et al . 1974)

佳 pH 值:9.0 (Mahler 1963)

消光系数:= 11.3 消光系数(Mahler 1963)

等电点:6.3 (Mahler 1963)

抑制剂:尿酸盐的各种嘌呤类似物(Bergmann等人1963Baum等人1956)和其他铜螯合剂。Fridovich (1965) 报告说,碱性溶液中的尿酸盐可以转化为有效的抑制剂,氧酸盐。

特异性:该酶对尿酸具有高度特异性。(见马勒 1963 年)。

稳定性:在 10% 饱和硫酸铵中纯化的尿酸酶在 5°下可稳定年。

 

艾美捷Worthington尿酸酶测定方法:

Method : 反应速度是通过测量尿酸氧化成尿囊素导致的 290 nm 处吸光度的降低来确定的。在特定条件下,个单位在 25°和 pH 8.5 下每分钟氧化 微摩尔尿酸。

 

试剂:

1.0.1 M 硼酸钠缓冲液,pH 8.5

2.0.12 mM 尿酸。将 60 mg 碳酸锂溶解在 15 ml 水中并过滤。通过将 100 mg 尿酸溶解在滤液中来制备新鲜溶液。可能需要加热至 50-60°以产生溶液。冷却并用试剂水定容至 100 ml。用 0.1 M 硼酸盐稀释 1/100pH 8.5

 

注意:使用,0.1 M 硼酸钠缓冲液和 0.12 mM 尿酸溶液应通过将 O 2鼓泡通过溶液 10-15 分钟进行氧化。每 20 分钟再充氧次。

 

酶:

以 1 mg/ml 溶解于冷 (5°C) 0.1 M 硼酸钠缓冲液,pH 8.5

 

方程:

在即将进行测定之,进步稀释至 0.01-0.1 单位/ml 的浓度。

 

程序:

将分光光度计调整到 290 nm 和 25°C

 

移液器如下:

硼酸盐缓冲液 0.5 毫升

0.12 毫米尿酸 2.0毫升

 

在分光光度计中孵育 4-5 分钟以达到温度平衡并确定空白率(如果有)。在零时间添加 0.5 ml 酶并记录 A 290的下降6-7 分钟。从曲线的初始线性部分计算 ΔA 290 

 

Worthington核心酶:包括:胶原蛋白酶,脱氧核糖核酸酶I,弹性蛋白酶,木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,胰蛋白酶等。

 

Worthington主要研究覆盖生物技术和生命科学研究,诊断,生物制药和生物加工应用的高质量纯化酶,蛋白质,核酸和试剂盒。艾美捷科技是Worthington的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源:https://www.amyjet.com/brand/Worthington.shtml

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