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凋亡检测实验-艾美捷喜树碱(Camptothecin)基本操作
点击次数:0发布时间:2022/12/28 16:16:23
更新日期:2022/12/28 16:16:23
所 在 地:中国大陆
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详细内容
Camptothecin is a potent cytotoxic pentacyclic alkaloid known for its potent apoptosis inducing properties. Camptothecin and its analogs have been demonstrated to inhibit oisomerase I (o I), causing cells in S phase to enter into apoptosis. Camptothecin binds to and stabilizes the o I – DNA backbone complex (covalent binary complex). This stabilized complex diminishes the rate of o I release from the broken strand, thus slowing the religation and subsequent DNA synthesis process. Use camptothecin to create positive controls in apoptosis detection experiments.
Reagent Name Camptothecin
Target DNA oisomerase I
Sample Type Cell culture
Storage -20°C
基本信息:
中文名:喜树碱
英文名:Camptothecin
化学名:1H-Pyrano[34:6,7]indolizino[1,2-6]puinoline-3,14(4H,12H-)-dione,4-ethy1-4-hydroxy-(s)-
分子式: C20H16N2O4
分子量: 348.34
来 源: 珙桐科植物喜树Camptotheca acuminata Decne的果实、叶。
喜树碱是一种植物抗癌药物,从中国中南、西南分布的喜树中提取得到。1976年中国化学家高怡生等合成消旋喜树碱成功。喜树碱对肠胃道和头颈部癌等有较好的近期疗效,但对少数病人有尿血的副作用。10-羟基喜树碱的抗癌活性超过喜树碱,对肝癌和头颈部癌也有明显疗效 ,而且副作用较少。
艾美捷喜树碱是一种具有抗肿瘤特性的细胞毒性植物生物碱,是一种原型DNA拓扑异构酶I抑制剂。在凋亡检测实验中使用喜树碱创建阳性对照。
艾美捷喜树碱(Camptothecin)基本操作:
1、将喜树碱粉末溶解在组织培养DMSO中,以获得2mg/mL喜树碱储备浓度。
2、制备50–100µL的DMSO增溶喜树碱等分试样,并将其冷冻保存在<-20°C。一瓶冷冻的喜树碱可在丢弃再解冻2次。应标记已解冻1X的小瓶,以表明这一点,以便它们在丢弃只经过一次解冻。
3、喜树碱浓度范围为2–4µg/mL的刺突细胞培养物,产生6–12µM的细胞培养物喜树碱浓度。该喜树碱浓度范围适用于诱导Jurkat或HL 60细胞悬浮液,其浓度范围通常为1 x 105–1 x 106细胞/mL。在此浓度范围内,培养4小时(37°C)后成功诱导凋亡。
4、对特定细胞系进行时间历程研究,以确定合适的喜树碱浓度和暴露时间,从而为实验实现良好的凋亡诱导水平。
艾美捷喜树碱(Camptothecin)相关研究:
FAM-FLICA® Caspase-1 (YVAD) Assay Kit
Pyroptosis/Caspase-1 Assay, Green
FLICA 660 Caspase-1 Assay Kit
FAM FLICA® Caspase-1 (WEHD) Assay Kit
Magic Red® Cathepsin-B Assay Kit
Magic Red® Cathepsin L Assay Kit
FAM-FLICA®Caspase-1(YVAD)检测试剂盒
焦下垂/Caspase-1测定,绿色
FLICA 660 Caspase-1检测试剂盒
FAM FLICA®Caspase-1(WEHD)检测试剂盒
Magic Red®Cathepsin-B分析试剂盒
Magic Red®组织蛋白酶L检测试剂盒