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中性蛋白酶研究-WBC-LS02112中性蛋白酶(分散酶)

点击次数:0发布时间:2023/2/2 16:36:57

中性蛋白酶研究-WBC-LS02112中性蛋白酶(分散酶)

更新日期:2023/2/2 16:36:57

所 在 地:中国大陆

产品型号:

简单介绍:中性蛋白酶(Dispase)(WBC-LS02112)是一种非哺乳动物来源的无(AOF)金属中性蛋白酶,通过沃辛顿开发的方法纯化。

相关标签:中性蛋白酶 

优质供应

详细内容

 中性蛋白酶由枯草芽胞杄菌经液体深层发酵培养并提炼精制而成的固体酶制剂。可用于各种蛋白质水解处理。在中性条件下,本品能将大分子蛋白质水解为氨基酸等产物。

 

【适用范围】可广泛应用于动植物蛋白的水解,制取生产高调味品和食品营养强化剂的HAPHP,以及皮革脱毛、软化、羊毛丝绸脱胶等加工。适用pH范围是6.0-80,PH70,湿度范围是10c60℃适温度50

【动植物蛋白水解粉应用】广泛用于生产高调味品和食品营养强化剂,各种动物来源性抽提物生产功能性骨、肉提取物(骨素)、水产提取物、蛋白胨、肽等及研究开发一些高附加值的功能食品。温度:50-55,PH6.0-7.0,用量:0.1-0.3%(干物重)

【医药工业的应用】含中性蛋白酶的药物,可起到消炎、利胆、止痛、助消化的功效

【纺织工业应用】用中性蛋白酶处理过的羊毛,其抗张度比常规方法高,毛线手感柔软,收缩性为0:还可用于蚕的脱胶和蚕丝的精炼。

【皮革工业的应用】参考用量:皮革脱毛150-300ug皮重,皮革软化8-15ug皮重。利用中性蛋白酶可制成脱毛剂,经鞣制的皮革,脱毛干净,粒而清晰,无明显损伤,毛孔细致光亮。

【饲料工业的应用】加入饲料配方中或直接与混合饲料混合饲喂,可提高蛋白质的利用率和降低饲养成本。

 

艾美捷中性蛋白酶Dispase®)是一种非哺乳动物来源的无(AOF)金属中性蛋白酶,通过沃辛顿开发的方法纯化。其温和的蛋白水解作用使该酶特别适用于原代细胞和二次(亚培养)细胞培养的制备,因为它对细胞膜温和。这种蛋白酶还用作细胞分离和组织解离应用中的二酶,通常与胶原蛋白一起使用。

 

中性蛋白酶(分散酶)WBC-LS02112测定

方法

在过氧化物酶偶联系统中,通过测量D-丙氨酸氧化引起的A436的增加来确定反应速度。一个单位每分钟氧化一微摩尔的D-丙氨酸,为37°CpH 8.3在规定条件下。

试剂

这种酶的性质要求准确制备底物。请注意按照以下说明进行操作。

1M 三重奏

缓冲液-底物(2%酪蛋白在0.05M Tris缓冲液中):搅拌约1分钟,将0.40gm酪蛋白(USB或同等产品)溶解在0.1ml试剂水中。加入0.1毫升2N NaOH5.1毫升0.7M Tris。让底物搅拌直至酪蛋白进入溶液。pH8.5,用稀磷酸继续搅拌50分钟。用试剂水制成终体积为0.<>ml。在移液底物之,请确保底物始终均匀,并且酪蛋白没有从溶液中掉出。如果酪蛋白似乎已从溶液中脱落,请勿使用底物进行测定。

酶活化剂 - 0.01 M 氯化钙2:溶解147毫克氯化钙2100毫升试剂水中。不使用时,请放入冰箱。

5%TCA:将5TCA溶解在100毫升试剂水中。在室温下保存。

酪氨酸标准品:在试剂水中以10 μ摩尔/ ml的浓度制备10毫升。(181微克酪氨酸= 1微摩尔)。称取18.1mg酪氨酸,搅拌至初始沸腾溶解于10ml试剂水中。从火上移开并冷却至约40°C进行测定。

0.5 M NaOH:将 1 g. 溶解在 50 ml 试剂水中,或从 1M 或 10M NaOH 稀释。

Folin & Ciocalteus 苯酚试剂,使用纯净

溶于浓度为5mg / ml的去离子水中,并制备150稀释液。使用25μl50μl一式两份。

程序

要清除玻璃管,请使用巴斯德移液管加入 1.0 ml 缓冲底物、20 μL 0.01M CaCl 2 和两酶稀释液:25μ和 50μl,每一式两份。还包括两个用于空白的无酶管,以及四个用于酪氨酸标准品的管,带有1ml缓冲底物,以及25μl50μl75μl100μl酪氨酸标准溶液。在15°C的水浴中孵育37分钟。通过加入2ml 5%TCA停止反应。混合每个试管,然后使用台式 Sorvall 或等效物以 2000 rpm 离心 10 分钟。从每个试管中取出(定量)1ml上清液,并加入标记的干净玻璃管中。然后在每个试管中加入2.0ml 0.5M NaOH。混合,然后加入0.1ml Folin-Ciacalteu试剂,550分钟后在A10处读取。A550 与微摩尔酪氨酸。绘制佳拟合线并选择落在线的线性部分内的样本读数,并按下面列出的方式进行计算。

计算

绘制酪氨酸标准品的标准曲线。在 A550 和酪氨酸微摩尔之间建立等效性。例如,使用50μl酶,稀释50倍,A550处的读数为0.26。从酪氨酸曲线A5500.26相当于0.75微摩尔酪氨酸。

 

来源:https://www.amyjet.com/products/WBC-LS02112.shtml

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