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影响细胞转染试验的因素有哪些？
点击次数：266 发布时间：2017/6/2
转染，是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入，细胞转染目前已面为实验室工作中经常涉及的基本方法。细胞转染的途径大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类。物理介导：电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例。化学介导：方法很多，如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术。生物介导：方法有较为原始的原生质体转染，和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。理想的细胞转染方法，应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。病毒介导的转染技术，是目前转染效率的方法，同时具有细胞毒性很低的优势。但是，病毒转染方法的准备程序复杂，常常对细胞类型有很强的选择性，在一般实验室中很难普及。其它物理和化学介导的转染方法，则各有其特点。
无论采用哪种转染技术，要获得*优的转染结果，可能都需要对转染条件进行优化。影响转染效率的因素很多，从细胞类型、细胞培养条件和细胞生长状态，到转染方法的操作细节，都需要考虑。爱测智能科技总结出影响转染试验的因素主要有以下几个：
1.转染试剂
不同细胞系转染效率通常不同，但细胞系的选择通常是根据实验的需要，因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献，通过这些资料可选择*适合实验设计的转染试剂。
2.细胞状态
一般低的细胞代数
3.转染方法
不同转染试剂有不同的转染方法，但大多大同小异。转染时应根据具体转染试剂推荐的方法，但也要注意，因不同实验室培养的细胞性质不同，质粒定量差异，操作手法上的差异等，其转染效果可能不同，应根据实验室的具体条件来确定*佳转染条件。
4.载体构建
转染载体的构建（病毒载体，质粒DNA,RNA,PCR产物，核苷酸等）也影响转染结果。病毒载体对特定宿主细胞感染效率较高，但不同病毒载体有其特定的宿主，有的还要求特定的细胞周期，如逆转录病毒侵染分裂期的宿主细胞，此外还需考虑一些安全问题（如基因污染）。除载体构建外，载体的形态及大小对转染效率也有不同的影响，如前面提到的超螺旋及线性DNA对瞬时和稳定转染的影响。如果基因产物对细胞有毒性作用，转染也很难进行，因此选择组成或可调控，强度合适的启动子也很重要，同时做空载体及其它基因的相同载体构建的转染正对照可排除毒性影响的干扰。
