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试剂盒洗涤
点击次数：309 发布时间：2017/11/1
洗刷在ELISA试剂盒进程中虽不是一个反响步骤，但却也决议着试验的胜败。ELSIA就是靠
洗刷来到达分离游离的和结合的酶符号物的意图。通过洗刷以铲除残留在板孔中没能与固
相抗原或抗体结合的物质，以及在反响进程中非特异性地吸附于固相载体的搅扰物质。聚
苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，而在洗刷时又应把这种非特异性吸附的搅扰物
质洗刷下来。可以说在ELISA操作中，洗刷是*主要的关键技术，应引起操作者的高度重
视，操作者应严厉按要求洗刷，不得马虎。
洗刷的方法除某些ELISA仪器配有特别的主动洗刷仪外，手工操作有浸泡式和流水冲
洗式两种，进程如下：
（1）浸泡式 a.吸干或甩干孔内反响液；b.用洗刷液过洗一遍（将洗刷液注满板孔
后，即甩去）；c.浸泡，即将洗刷液注满板孔，放置1-2分钟，间歇摇动，浸泡时刻不可随
意缩短；d.吸干孔内液体。吸干应完全，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液体后在清
洁毛巾或吸水纸上拍干；e.重复操作c和d，洗刷3-4次（或按阐明规则）。在间接法中如本
底较高，可增加洗刷次数或延伸浸泡时刻。
（2）ELISA试剂盒微量滴定板多选用浸泡式洗刷法。洗刷液多为含非离子型洗刷剂的中性缓冲液。聚苯
乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的，非离子型洗刷剂既含疏水基团，也含亲水基团，其
疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合，然后削弱蛋白质与固相载体的结合，并借助
于亲水基团和水分子的结合作用，使蛋白质回复到水溶液状况，然后脱离固相载体。洗刷
液中的非离子型洗刷剂一般是吐温20，其浓度可在0.05%-0.2%之间，高于0.2%时，可使
包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。
（3）流水冲刷式 流水冲刷法*初用于小珠载体的洗刷，ELISA试剂盒洗刷液仅为蒸馏水甚至可用
自来水。洗刷时附接一特别设备，使小珠在流水冲击下不断地翻滚淋洗，持续冲刷2分钟
后，吸干液体，再用蒸馏水浸泡2分钟，吸干即可。浸泡式犹如盆浴，流水冲刷式则比如
淋浴，其洗刷作用更为完全，且也简便、快速。已有试验标明，流水冲刷式相同也适用于
微量滴定板的洗刷。洗刷时设法加大水流量或加大水压，让水流冲击板孔外表，洗刷作用
更佳。
