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Gibco C11995500BT 国产DMEM高糖培养基(含L-谷氨酰胺,丙酮酸钠,不含HEPES)
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详细内容
Gibco DMEM高糖培养基(C11995500BT)
产品简介:
Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM)是一种广泛使用的基础培养基,用于支持许多不同哺乳动物细胞的生长。在DMEM中成功培养的细胞包括原代成纤维细胞、神经元、神经胶质细胞、HUVECs和平滑肌细胞,以及细胞系如HeLa、293、Cos-7和PC-12。
产品属性:
葡萄糖:高糖
HEPES缓冲液:无HEPES
血清补充:标准血清补充
运输条件:室温
丙酮酸钠添加剂:丙酮酸钠
形式:液体
谷氨酰胺:L-谷氨酰胺
酚红指示剂:酚红
应用:哺乳动物细胞培养
产品订购:
货号 | 产品名称 | 规格 |
C11995500BT | DMEM, high glucose, pyruvate | 500mL |
1. 液体培养基的保存是冷藏好?还是冷冻好?
要冷藏!!因为液体培养基经冷冻后再经溶化时,其溶液的pH值会发生改变,溶液往往变碱,某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。故液体培养基一定要存放在冷藏箱中,通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月 ~ 一年。
2. 液体培养基中谷氨酰胺的作用,及使用方法。
几乎所有的细胞对谷氨酰胺有较高的要求,细胞需要谷氨酰胺合成蛋白质,在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡。所以,各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置-20 ?C冰冻保存,用加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4 ?C 冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷氨酰胺。基础医学细胞中心在其服务项目中配制分装了高浓度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支)。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml*培养基中,其终浓度为2mM/ml培养基。包装为粉红色,-24?C保存。
3.液体培养用液pH对细胞生长的影响
由于,大多数细胞适宜pH为7.2~7.4,偏离此范围对细胞将产生有害的影响。各种细胞对pH的要求也不*相同,原代培养细胞一般对pH变动耐受差,无限细胞系耐受力强。
但总体来说,细胞耐酸性比耐碱性强一些,偏酸环境中更利于细胞生长。因此,我们在配制培养用液时,可把液体的pH稍微调得偏酸一些。液体在经过0.10um或0.22um滤膜过滤时,溶液的pH还会向上浮动0.2左右。
4.细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗?
不见得!因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下,pH 8.0 , 温度 37 oC 其作用能力zui强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化,一定要用D-Hanks液或PBS液反复冲洗细胞培养瓶,以便于将含血清的培养基冲洗干净,这样就能大大提高消化液的消化能力。本中心通常使用的消化液浓度为:
(1)0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA;
(2)0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA。
(3)0.25% 胰蛋白酶
溶液pH8.0~9.0;使用D-Hank液配制。
多数细胞传代消化可使用0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA这种消化液。
热门标签:Gibco C11995500BT DMEM高糖培养基 细胞培养