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基因型

rpsL (Str R) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB) /F′ [traD36 proAB lacI^qlacZΔM15]

产品说明

JM110菌株具有硫酸链霉素抗性(StrR) ；是甲基化基因dam、dcm 缺失的菌株，提取得到的质粒DNA，可被对dam、dcm甲基化敏感的内切酶切割； lacI^qlacZΔM15的存在使JM110可以进行蓝白斑筛选，但转化效率不高，High5^TM系列JM110感受态细胞经特殊工艺制作，经pUC19 质粒检测转化效率约10⁷ cfu/μg。一般不用于质粒构建，只适用于质粒转化。
 

操作方法

1. JM110感受态细胞放置冰中融化（或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中），加入目的DNA并用手拨打EP管底轻轻混匀，冰上静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基（2YT或LB），混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

注意事项

1. 感受态细胞在冰上融化。

2. 混入质粒时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒可相应减少*终用于涂板的菌量。