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缓冲液的性质
点击次数:264 发布时间:2016/12/5 13:39:30
缓冲液的性质:缓冲液的pH值会影响待分离生物大分子的解离程度,从而对其带电性质产生影响,溶液pH值距离其等电点愈远,其所带净电荷量就越大,电泳的速度也就越大,尤其对于蛋白质等两性分子,缓冲液pH还会影响到其电泳方向,当缓冲液pH大于蛋白质分子的等电点,蛋白质分子带负电荷,其电泳的方向是指向正极。为了保持电泳过程中待分离生物大分子的电荷以及缓冲液pH值的稳定性,缓冲液通常要保持一定的离子强度,一般在0.02~0.2,离子强度过低,则缓冲能力差,但如果离子强度过高,会在待分离分子周围
形成较强的带相反电荷的离子扩散层(即离子氛),由于离子氛与待分离分子的移动方向相反,它们之间产生了静电引力,因而引起电泳速度降低。另外缓冲液的粘度也会对电泳速度产生影响。
电场强度:电场强度(V/cm)是每厘米的电位降,也称电位梯度。电场强度越大,电泳速度越快。但增大电场强度会引起通过介质的电流强度增大,而造成电泳过程产生的热量增大。电流在介质中所做的功(W)为:W=I2·R·t;式中:I为电流强度,R为电阻,t为电泳时间。
电流所作的功绝大部分都转换为热,因而引起介质温度升高,这会造成很多影响:
1、样品和缓冲离子扩散速度增加,引起样品分离带的加宽。
2、产生对流,引起待分离物的混合。
3、如果样品对热敏感,会引起蛋白变性。
4、引起介质粘度降低、电阻下降等等。电泳中产生的热通常是由中心向外周散发的,所以介质中心温度一般要高于外周,尤其是管状电泳,由此引起中央部分介质相对于外周部分粘度下降,摩擦系数减小,电泳迁移速度增大,由于中央部分的电泳速度比边缘快,所以电泳分离带通常呈弓型。降低电流强度,可以减小生热,但会延长电泳时间,引起待分离生物大分子扩散的增加而影响分离效果。所以电泳实验中要选择适当的电场强度,同时可以适当冷却降低温度以获得较好的分离效果。
A0465-1GCHAPS 3-(3-胆胺丙基)二甲氨基-1-丙磺酸75621-03-3
TJ527-5GTES N-三(羟甲基)甲基-2-氨基乙磺酸70331-82-7
TJ527-10GTES N-三(羟甲基)甲基-2-氨基乙磺酸70331-82-7
P0169-250GPIPES,sodium salt 哌嗪-N,N-双(2-乙磺酸)
A0488-25GPIPES,sodium salt 哌嗪-N,N-双(2-乙磺酸)100037-69-2
A0488-100GPIPES,sodium salt 哌嗪-N,N-双(2-乙磺酸)100037-69-2
M225-10GBES N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸10191-18-1
H0511-25GHEPES N-2-羟乙基哌嗪-Ni2-乙磺酸钠7365-45-9
H0511-100GHEPES N-2-羟乙基哌嗪-Ni2-乙磺酸钠7365-45-9
D1501-50mgCalf Thymus DNA 小牛胸腺DNA73049-39-5
13348-1g(±)-ABA (Abscisic Acid) 脱落酸14375-45-2
CB5883-1gPectolyase 果胶酶9032-75-1
Ll131-100mgPectolyase Y-23 果胶酶Y-23--
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004669-100mgNADP 氧化型辅酶II24292-60-2
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