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研究细胞活力检测

点击次数:134 发布时间:2017/1/4 9:43:57
细胞毒性是由合成化合物、细胞自然产生毒性或免疫调节细胞(如细胞毒性T 淋巴细胞,自然杀伤细胞等)引起的细胞杀伤事件。同细胞凋亡及坏死不同,细胞毒性不是指某种特定的细胞死亡机制。细胞活力检测是检测样本中健康细胞的数目,这在优化细胞培养条件实验(如未分化细胞培养,原代细胞培养等)中是必须的。主要研究方法包括膜损伤检测、代谢活性检测、DNA合成检测等。
代谢活性检测
通过添加四咪唑盐到细胞中可进行线粒体内酶代谢活性的测定。在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物(formazan)。颜色的深浅与细胞的增殖成正比,与细胞毒性成反比。现有的方法如MTT法、XTT法、WST-1法及CCK-8法。各种方法比较如下:DNA的新组装合成是细胞生长的必要条件,故经常被用来进行细胞增殖、细胞活力及凋亡的检测。 BrdU及EdU,都是胸腺嘧啶的非放射性类似物,能掺入增殖细胞的DNA中,可通过对BrdU及EdU的检测,从而对DNA的合成量进行测定。
膜损伤检测
使用染料对细胞进行染色(台盼蓝染色法),膜受损细胞将会染上色,清点未着色的健康细胞数目,从而检测细胞膜的状态。另一种目前更常用的方法是对细胞培养上清液中的LDH酶活性进行检测。Cytotoxicity Detection Kit PLUS (LDH)  是使用ELISA方法在96/384孔板中高通量地定量检测细胞毒性。LDH是个稳定的细胞质蛋白,正常情况下在所有细胞中保持几乎相同的浓度,因此可通过检测受损细胞释放的LDH,对细胞毒性/细胞活性进行简单定量,从而判断细胞膜的受损情况。此外,还可通过检测上清液中的其他酶活方法来检测细胞毒性,如碱性磷酸酶、酸性磷酸酶等。
雷公藤红 
劳拉西泮:用于系统适用性试验0000576
劳拉西泮(L0750500
劳拉西泮 杂质D0000718
莨菪碱 杂质E0000449
蓝藻叶黄素 
兰雪醌,白花丹精,矶松素,白花丹醌16920
兰索拉唑:用于峰鉴别试验0000774
兰索拉唑000077 
赖诺普利(L0702000
赖诺普利 二水合物:用于性能测试(L0702100
赖脯胰岛素0000 48
 
 
 

原创作者:上海抚生实业有限公司

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