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合适的荧光染料该怎么选择
点击次数:188 发布时间:2017/1/9 11:06:39
如何选择合适的荧光染料
(1)确定荧光染料本身所适合的流式细胞仪,需要了解染料的激发波长和发射波长、仪器所配制的检测滤光片和激发光源。
(2)了解荧光素的相对荧光强度:相对荧光强度反映的是荧光素-单抗结合物的亮度,其判断标准是染色指数。影响相对荧光强度的因素包括:不同仪器的激光及滤片组合不同,荧光素的相对荧光强度不同;抗体上荧光素分子的多少会影响相对的荧光强度。
(3)选择原则:考虑抗原的密度【高密度表达的抗原可考虑选择几乎所有的荧光素;低密度表达的抗原需要可提供较高S/N比值的荧光素,如PE/APC。】;自发荧光【每种细胞群都有不同水平的自发荧光,所有的荧光通道均可观察的自发荧光,但自发荧光强度在波长较长时迅速降低。对自发荧光较强的细胞,选择发射波长长的荧光素(APC)可得到较好的S/N比值,对于自发荧光强度弱的细胞,发射波长长的荧光素对S/N提高没有明显的改善,可选用FITC。】;非特异性结合;复合染料【避免信号衰退。复合染料因为光、固定剂或温度升高会导致信号衰退,使复合染料在上一级染料处发光。减少样本暴露于光、高温或固定剂,可很大程度上避免这一问题。若样本需要固定,要选择稳定的固定剂,可有效阻止复合染料的信号衰退。尽量减少信号间的干扰,检测的颜色越多,面临的信号干扰越多,选择试剂时尽可能降低荧光发射波长间的重叠。】。
异喹啉-3-甲酸丹磺酰氯4-甲氧基噻吩-3-羧酸甲酯
N-(2-乙醛基)邻苯二甲酰亚胺3,5-二氯-4-甲基苯胺N-乙酰-2'-脱氧胞苷
2-甲氧基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊-2-基)吡啶3-甲氧基氮杂环丁烷盐酸盐2,3-二氟苯乙酮
无水三氯化铬2-氨基-异邻苯二甲酸4-苯甲氧基-2-甲氧基苯甲醛
4-溴-2-氟-6-硝基甲苯2-甲硫基-4-氯嘧啶3'-甲基-4-二甲氨基偶氮苯
4-溴苯乙酸甲酯德瓦达合金2-羟基-3-氨基-5-甲基吡啶
3-羟基异恶唑-5-甲酸甲酯1,4-二氯-2-碘苯N-乙酰苯胺
4-氟-3-甲氧基苯甲醇5-氨基-2,4-二氯嘧啶2-氨基-2,4-二氯烟酸甲酯
4-碘苄基溴2,3-二氮杂萘酮吡啶酮乙醇胺盐
三苯基铋4-甲基-3-三氟甲基苯乙酸5-氨基-2-甲基苯酚硫酸盐
5-甲氧基吡啶-2-羧酸2-(氯甲基)-1,3-苯并噻唑对硝基苄醇丙二酸单酯镁
4-甲基吡啶-3-硼酸4-氯-2-氟苯酚4-氨基哌啶-1-甲酸苄酯
1-Boc-哌啶2-氟-5-甲氧基苯硼酸3,3'-二氟二苯二硫醚
N-羟基-异丁酰胺2,6-二氟肉桂酸对氯苯基叔丁基醚
beta-环糊精水合物3-氯-3-甲苯-1-丁炔N-乙基-N-羟乙基苯胺
原创作者:上海抚生实业有限公司