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质粒DNA超速离心分离特征
点击次数：158 发布时间：2017/1/13 10:35:53
质粒DNA超速离心分离的*新进展
1．超速垂直管转头的离心分离（钦合金或碳纤维制造的）：从1975年垂直管转头向世后，转速从50,000rpm到120,000rpm,RCFmax可达700,000Xg，90年代开发的新机型和转头己能够使质粒DNA垂直管离心分离实验做起来得心应手。
2．近垂直管转头离心分离：为了消除垂直管转头用于质粒DNA离心在壁部形成的RNA沉淀对已形成的DNA区带的污染，同时也为了改进一般斜角式转头（倾角25·——35·）由于沉降距离较长，因而分离时间也较长的缺点，近几年开发了多种近垂直管转头（即Near VerticalTube Rot时，简称NVT转头或Neo Angle Rotor，小假角转头，简称NT).它们的离心管纵剖面中心轴线与离心机驱动轴线之间夹角在7.5·——10·之间，转速从65,000rpm到120,OOOrpm，RCFmax可达646,000×g单管容量从2ml至13.5ml。NVT（或NT）转头的开发主要是为质粒DNA分离而设计，当然它也适用于线粒体DNA、染色体DNA、RNA及血清脂蛋白的分离·纯化。
3．不连续阶梯梯度分离：质校DNA分离纯化传统方法是采用金管CsCl自形成梯度平衡等密度离心法，离心开始时金管CsCl密度均一，样品均匀分布其中。
质粒DNA超速离心传统的分离方法：数年前，由于受设备条件限制，质粒DNA的分离一般用CsCl平衡等密度离心法，自形成梯度。以10~12ml单管容量为例，用甩平转头分离，36.000rpm×60小时，用角式转头分离45,000rpm×36小时，前者包括加减速在内共用去1.3亿转驱动部寿命，后者也要用去1亿转驱动部寿命，这对当时超速离心机总寿命为100~200亿转来看，无疑每次实验费用过高，加上CsCl用量多、价格贵等因素，使这类分离纯化工作成为非常昂贵的实验。
柱式昆虫 RNAout50 次Okadaic acid 钾盐 (PP1 和 PP2A 抑制剂 )
柱式毛发 DNAout50 次Oligo dT12-18 引物，0.5μg/μL
柱式内毒素清除剂1.5mLOligo 快速复性液，10×
柱式尿液 DNAout50 次Oligo(dT) 纤维素
柱式凝固血液 DNAout50 次Oligo(dT) 再生溶液
柱式葡萄球菌 RNAout50 次OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受态细胞
柱式软骨 RNAout50 次ONPG 干粉
柱式软体 RNAout50 次ONPG 溶液，10mg/mL
柱式软体动物 DNAout50 次OPD 干粉
柱式石蜡包埋组织 DNAout30 次Origami B 菌种
柱式石蜡包埋组织 DNAout2.0（二代测序专用）50 次Origami B(DE3) 菌种
柱式拭子 DNAout50 次Origami B(DE3)plysS 感受态细胞
原创作者：上海抚生实业有限公司
