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小鼠骨钙素/骨谷氨酸蛋白（OT/BGP）试剂盒使用说明书
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文件大小：22kb
上传时间：2016/11/30 10:18:35
文件类型：jpg
上 传 者：上海抚生实业有限公司
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小鼠骨钙素/骨谷氨酸蛋白（OT/BGP）试剂盒检测范围： 96T
3μg/L -120μg/L
使用目的：
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中骨钙素骨/谷氨酸蛋白(OT/BGP)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠骨钙素骨/谷氨酸蛋白(OT/BGP)水平。用纯化的小鼠骨钙素骨/谷氨酸蛋白(OT/BGP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入骨钙素骨/谷氨酸蛋白(OT/BGP)，再与HRP标记的骨钙素骨/谷氨酸蛋白(OT/BGP)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的骨钙素骨/谷氨酸蛋白(OT/BGP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠骨钙素骨/谷氨酸蛋白(OT/BGP)浓度。
小鼠骨钙素/骨谷氨酸蛋白（OT/BGP）试剂盒 操作步骤
加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品*终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品*终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
温育：操作同3。
洗涤：操作同5。
显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
小鼠骨钙素/骨谷氨酸蛋白（OT/BGP）试剂盒
小鼠骨钙素/骨谷氨酸蛋白（OT/BGP）试剂盒
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