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小鼠丙酮酸激酶（PK）ELISA试剂盒使用说明书
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上传时间：2017/1/9 11:09:08
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上 传 者：上海抚生实业有限公司
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小鼠丙酮酸激酶（PK）elisa试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 小鼠丙酮酸激酶(PK)水平。用纯化的小鼠丙酮酸激酶(PK)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入丙酮酸激酶(PK)，再与HRP标记的丙酮酸激酶(PK)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的丙酮酸激酶(PK)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠丙酮酸激酶(PK)浓度。
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品*终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
小鼠丙酮酸激酶（PK）ELISA试剂盒
小鼠丙酮酸激酶（PK）ELISA试剂盒
甲睾酮1-(3,4-二)哌嗪4-氰基肉桂酸
2-苄氧基溴乙烷2-甲氧基羰基苯磺酰胺2-三氟甲氧基苯甲酸
亚硫酸亚乙酯2,5-二氯-4-甲基吡啶叔丁氧羰基-D-2,4-二氨基丁酸
2-氯甲基-3-甲基-4-(3-甲氧丙氧基)吡啶盐酸盐4-氯-3-溴甲苯3-溴苯丙酮
3-溴-4-甲基三氟甲苯3-(二氟甲氧基)苄基溴5-溴-2,3-二氟苯酚
4-戊基双环己烷甲酸2-氨基-3-溴-5-氟吡啶左旋肉碱酒石酸盐
左旋苯甘氨酸酰胺荧光增白剂 OB-15-溴-3-氰基吲哚
5-氯-2-三氟甲氧基苯胺氧化异佛尔酮1,3-二乙苯
3,5-二叔丁基-4-羟基苯甲酸正十六酯三乙基甲基氯化铵6,7-二甲氧乙氧基喹唑啉-4-酮
1,4-二甲基喹啉酮3-氨基-4－－碘-吲唑氟洛芬
2-氯-5-氟甲苯二茂铁甲醇1-丙基-4-[2-(4-甲氧苯基)乙炔基]苯
2-甲基-4-吡啶硼酸2-(二氟甲氧基)苯胺1-氨基环丙烷甲酸甲酯盐酸盐
4,4,4-三氟巴豆酸乙酯5-氯-2-羟基吡啶2-溴-1,4-二氯苯
4-邻苯二甲酰亚氨基环己酮二甲氨基苯乙酮氢醌二(2-羟基乙基)醚
二(3-三甲氧基甲硅烷基丙基)胺2-甲基-4-溴苯甲醚2-溴-4-氟-6-(三氟甲基)苯胺
二叔丁基硅基双(三氟甲烷磺酸)(R)-N-叔丁氧羰基-3-氨基-3-苯基丙-1-醇5,5-二甲基海因
小鼠丙酮酸激酶（PK）ELISA试剂盒
小鼠丙酮酸激酶（PK）ELISA试剂盒
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