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人诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)ELISA试剂盒使用说明书
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上传时间：2017/2/17 14:04:13
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上 传 者：上海抚生实业有限公司
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人诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)elisa试剂盒操作步骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
32ng/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
16ng/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
8ng/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
4ng/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
2ng/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品*终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
人诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)ELISA试剂盒样本处理及要求：
1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
CAS9001-12-1胶原酶Ⅳ型100mg
CAS9001-12-1胶原酶Ⅲ型100mg
CAS9001-12-1胶原酶Ⅲ型100mg
CAS9001-12-1胶原酶Ⅲ型100mg
CAS9001-12-1胶原酶Ⅱ型100mg
CAS9001-12-1胶原酶Ⅱ型100mg
CAS9001-12-1胶原酶Ⅱ型100mg
CAS9001-12-1胶原酶Ⅰ型100mg
CAS9001-12-1胶原酶Ⅰ型100mg
CAS9001-12-1胶原酶Ⅰ型100mg
CAS9001-08-5丁酰胆碱酯酶500U
CAS9001-08-5丁酰胆碱酯酶500U
CAS9001-08-5丁酰胆碱酯酶500U
CAS9001-05-2过氧化氢酶10mL
CAS9001-05-2过氧化氢酶10mL
CAS9001-05-2过氧化氢酶10mL
CAS9001-05-2过氧化氢酶 ( 牛肝 )1g
CAS9001-05-2过氧化氢酶 ( 牛肝 )1g
CAS9001-05-2过氧化氢酶 ( 牛肝 )1g
CAS9001-03-0碳酸酐酶 ( 牛红血球 )50 mg
CAS9001-03-0碳酸酐酶 ( 牛红血球 )50 mg
人诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)ELISA试剂盒
人诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)ELISA试剂盒
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