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技术文章

INTERFERin™-HTSpolyplus转染新产品

点击次数:2977 发布时间:2016/12/9 13:33:55

 INTERFERin™-HTS

--polyplus新型转染试剂

产品优势:
》 适用于siRNA的高通量转染
》 具有高重复性的结果
》 10 ~50 nM siRNA可达*佳沉默效率
》 高性价比——每孔所用转染试剂较少,实验花费少
》 可进行正向、反向和批量操作,与血清和抗生素兼容
》 贮存方便:试剂为水溶液,4度可保存一年

INTERFERin™-HTS是新一代siRNA转染试剂,特别针对高通量应用而研发,利用较少的试剂即可达到高基因沉默效率、高重复性结果和极好的细胞活性。INTERFERin™-HTS 性价比高、操作简便、与血清和抗生素兼容,可在96孔板和384孔板进行正向、反向和批量操作。

高基因沉默效率、低细胞毒性
使用INTERFERin™-HTS转染10 nM PLK1-siRNA,进行细胞死亡诱导的表型分析,实验结果表明该基因沉默能够诱导90%以上的细胞死亡(图1)。同时,INTERFERin™-HTS转染不带目的基因的siRNA 的实验表明该转染试剂的细胞毒性很小(89% ± 7%的细胞活性)。

图1. 在384孔板中INTERFERin™-HTS将siRNA转染到 Hela细胞,高效的诱导细胞死亡

诱导细胞死亡的siRNA (PLK1, 0.05Ul) 反向转染Hela细胞, 阴性对照为不带目的基因siRNA (0.05uL),转染后72小时,通过荧光显微镜检测细胞活性。

高重复性结果

INTERFERin™-HTS在不同水平的高重复性结果:
不同孔间 ► 每个样本进行三个复孔实验,结果显示各样本的复孔间差异极小,可取三复孔间任一数据作为实验结果(图1)
不同实验间 ►利用同一批次的INTERFERin™-HTS进行三个单独的转染实验,显示出相同的沉默效率(图2)
不同批次间 ►利用三个不同批次的INTERFERin™-HTS进行转染显示出高度一致的结果(图3)

图2. 96孔板中不同实验间的重复性结果

在3个不同的实验中,用INTERFERin™-HTS将10 nM GL3Luc siRNA转染到能够稳定表达荧光素酶基因的A549细胞,以0.05 μL的INTERFERin™-HTS做阴性对照。转染后48小时检测荧光素酶表达。

图3. 96孔板中不同批次间的重复性结果

用3个不同批次的INTERFERin™-HTS将10 nM GL3Luc siRNA转染到能够稳定表达荧光素酶基因的A549细胞, 0.05 μL的INTERFERin™-HTS做阴性对照。转染后48小时检测荧光素酶表达。


高基因沉默效率

用INTERFERin™-HTS转染内源性的lamin A/C siRNA,其基因沉默效率高于目前市场上的另外三个常规转染试剂。

图4. 与其他同类试剂比较, INTERFERin™-HTS转染siRNA 的沉默效率更高

在96孔板中, 用10 nM lamin A/C siRNA反向转染Hela细胞, 24小时后通过分支DNA分析检测lamin A/C的表达,用GAPDH作对照。


极高的性价比
与其它同类试剂比较,使用较少量的INTERFERin™-HTS即可获得基因表达的高沉默率;同规格条件下,该试剂可转染的培养板数至少为其它试剂的2倍。

表1. 96孔板中每孔所需试剂体积(INTERFERin™-HTS和其它同类试剂)和1.5 mL试剂所能转染的板数,实验采用siRNA的反向转染。

原创作者:上海信裕生物科技有限公司

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