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NCI-H1437 [H1437];人肺癌细胞
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抗体
蛋白/多肽/抗原
原代细胞
细胞系
分子生物学
生化试剂
标准品/对照品
详细内容
NCI-H1437 [H1437];人肺癌细胞
细胞货号:XY-H152
细胞别名:BL1437
细胞描述:人非小细胞肺癌细胞,阶段 1,腺癌。来源于胸腔积液转移灶。患者是个吸烟者,每年吸烟 70 包。
物种: 白人,男性,60 岁
组织:肺;分离自转移灶:胸腔积液
细胞来源:2016 年引进
生物安全等级:BSL-1
完全培养液配方:见下方备注
批次/冻存日期:详见 冻存管/培养瓶 标识
参考传代比例:1:3
参考传代周期:4-6 天
参考换液频率:每周 2-3 次
冻存液配方:完全培养液 95%,DMSO 5%
细胞形态:上皮样,贴壁生长
支原体检测结果:阴性
STR 鉴定结果:
Amelogenin: X
CSF1PO: 11,12
D13S317: 12
D16S539: 11,12
D5S818: 11,14
D7S820: 8,11
THO1: 6
TPOX: 9,10
vWA: 18
STR profile
Markers
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 11,12 |
D5S818 | 11,14 |
D7S820 | 8,11 |
D8S1179 | 11,13 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 15,19 |
D21S11 | 29,30 |
FGA | 22,24 |
TH01 | 6,8 |
TPOX | 9,10 |
vWA | 17,18 |
二、细胞培养操作
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL完全培养基,培养过夜)。第三天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
b、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
c、弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
d、待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
b、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
c、用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
d、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
三、培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,用新鲜的完全培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议 1:2 传代 。
9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。