人胚肾细胞,293(HEK-293)细胞
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生化试剂
标准品/对照品
详细内容
细胞名称:293(HEK-293) 人胚肾细胞
组织来源:肾;以腺病毒5 DNA 进行转化
培养条件:DMEM +10% FBS;37℃,5% CO2
形 态:贴壁;上皮细胞样
背 景:293细胞是剪切过的人腺病毒5(Ad5)转染的人胚肾细胞形成的永生化细胞。 此细胞包含并表达转染的Ad5基因。早期报道中指出该细胞基因组中含有腺病毒5(Ad5)基因组的左侧端和右侧端的DNA,但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现,Ad5的1~4344位线性核苷酸整合入细胞染色体19q13.2。该细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主。可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体,由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。 需在生物安全2级实验室操作。
人胚肾细胞,293(HEK-293)细胞各种肿瘤细胞,说一点自己的看法:
1. 培养细胞前,可以看看细胞特点说明书,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。
2. 不同细胞生长周期不同,有的生长很快,比如说 MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分就已经足够了,有的又是特别慢,等的人心焦,BT474 就是,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满,所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了。
3. 对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况。
4. 冻存细胞复苏后第二天更换一次培养基。
5. 培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次。
6. 养细胞的教训:不能偷懒!
人胚肾细胞,293(HEK-293)细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。
1. 不管买的细胞、惠赠的细胞,刚拿到手赶紧做两件事:检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存。
2. 发现有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染,真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,买个支原体检测的 kit 定期检测一下。
3. 细胞房日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸。
4. 细胞的传代一定要规律,保持相同的 confluency 和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延。
5. 注意个人卫生。
养人胚肾细胞,293(HEK-293)细胞真的不难,*关键几点:
1. 所有的东西使用的,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏。
2. 动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因。
3. 有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措。
4. 要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,细胞房的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验。
5. 个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,*近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢。
6. 细胞房不能进去太多人,避免相互干扰。
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