数量：大量
保质期：一年
保存条件：4℃保存
规格：25次
本产品的特点是：
1. 一站式操作，本试剂盒足够50次微量真菌总RNA提取，25次从总RNA开始的微量mRNA提取。
2. 得到的mRNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、microarray hybridization、cDNA合成等。
3. 操作比柱式法mRNA纯化法更简单，不需要过柱，免去很多繁琐步骤。
4. 整个过程只需要约60分钟。

我准备按照你提供的基本程序尝试一次。一站式真菌MRNAOUT还需要问的问题是：

1.洗涤包含体，实际上就是洗涤细胞裂解液离心后的沉淀，对吗？我将沉淀-20度保存，应该没有什么影响吧？另外，我看到有的包含体洗涤液配方中含有PMSF，是蛋白酶抑制剂，它是否对目的蛋白有影响呢？

2.尿素洗涤包含体，洗涤上清和沉淀分别进行SDS-PAGE，得到一个收率和纯度*佳的尿素浓度。一站式真菌MRNAOUT洗涤上清和沉淀是指用尿素洗涤细胞裂解沉淀的吗？但不溶的沉淀能跑SDS-PAGE吗？这个收率和纯度是指洗涤后溶液里面浸出的目的蛋白吗？

3.我表达的目的蛋白是分解底物释放无机磷酸盐的一种水解酶，不适合用含有磷酸盐的PBS溶液来洗涤和缓冲，而是用Tris-HCl来洗涤和缓冲的。那我用Tris-HCl来配8M尿素，对复性有影响吗？

不知道你能否提供相应的参考文献或者书目给我，我再仔细看看。

一站式真菌MRNAOUT技术回答：

1）包含体在-20度或-70度保存较好，包含体状态的蛋白稳定性好，一但复性成功，溶液状态的蛋白容易被降解。PMSF，是蛋白酶抑制剂，应该对目的蛋白影响不大。我原来做实验时一般不加PMSF，加与不加看你的蛋白的稳定性。

2）洗涤上清和沉淀是指用尿素洗涤细胞裂解产物离心后的沉淀，用tip挑一点沉淀后用1倍的loading buffer重悬，与其他样品一起煮后电泳。从洗涤上清和沉淀的电泳情况可以看出目的蛋白的损失情况和杂蛋白的去除情况，一站式真菌MRNAOUT选择一个合适的洗涤条件有时对纯化和得率很重要。

3）用Tris配尿素，OK! 

 ZI202-1兔抗人纤维蛋白原0.5mlZOMANBIO

ZI203-1兔抗人血清（多价抗体)0.5mlZOMANBIO

ZI204-1兔抗人IgG-F(ab）20.5mlZOMANBIO

ZI205-1兔抗人白蛋白0.5mlZOMANBIO

ZI206-1兔抗人IgG-FC0.5mlZOMANBIO

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ZI208-1兔抗人小鼠血清0.5mlZOMANBIO

ZI209-1兔抗小鼠IgG-FC0.5mlZOMANBIO

ZI210-1兔抗大鼠IgG0.5mlZOMANBIO

ZI211-1兔抗狗IgG0.5mlZOMANBIO

ZI212-1兔抗猪IgG0.5mlZOMANBIO

ZI213-1兔抗HRP0.5mlZOMANBIO

ZI214-1兔抗Biotin（生物素）0.5mlZOMANBIO

ZI215-1兔抗FITC0.5mlZOMANBIO

ZI216-1兔抗Avidin（卵清亲和素）0.5mlZOMANBIO

ZI217-1兔抗Dig血清0.5mlZOMANBIO

ZI218-1兔抗羊IgG0.5mlZOMANBIO

ZI219-1兔抗马IgG 0.5mlZOMANBIO

ZI220-1兔抗猴IgG0.5mlZOMANBIO

ZI221-1兔抗鸡IgG0.5mlZOMANBIO