数量：大量
保质期：一年
保存条件：溶液A需4℃保存，其余可以室温保存
规格：5次
本产品是的柱式DNA清除剂（CAT#：90318）的大提升级产品，可用于细胞总RNA样品中基因组DNA污染的去除。目前*常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。本公司开发的大提柱式非酶DNA清除剂不但彻底避免了RNase-free DNase的这一缺陷，同时还具有下列特点。
1. 处理量大，一次可以处理高达400 μg的总RNA。
2. 操作简单快速，全部操作只需要十余分钟。
3. 回收率高达80%以上。
4. 高效，能使总RNA中的基因组DNA污染降低到电泳检测不到的水平，而RNA分子完整性不受任何影响。
5. 本身不含RNase污染，避免了用DNase处理的问题。
6. 稳定，本产品为非酶产品，可以常温运输和4℃长期保存；而RNase-free DNase的运输和长期保存必须在低温进行。
7. 性价比高，单位成本远低于RNase-free DNase。

我准备按照你提供的基本程序尝试一次。大提柱式DNA清除剂还需要问的问题是：

1.洗涤包含体，实际上就是洗涤细胞裂解液离心后的沉淀，对吗？我将沉淀-20度保存，应该没有什么影响吧？另外，我看到有的包含体洗涤液配方中含有PMSF，是蛋白酶抑制剂，它是否对目的蛋白有影响呢？

2.尿素洗涤包含体，洗涤上清和沉淀分别进行SDS-PAGE，得到一个收率和纯度*佳的尿素浓度。大提柱式DNA清除剂洗涤上清和沉淀是指用尿素洗涤细胞裂解沉淀的吗？但不溶的沉淀能跑SDS-PAGE吗？这个收率和纯度是指洗涤后溶液里面浸出的目的蛋白吗？

3.我表达的目的蛋白是分解底物释放无机磷酸盐的一种水解酶，不适合用含有磷酸盐的PBS溶液来洗涤和缓冲，而是用Tris-HCl来洗涤和缓冲的。那我用Tris-HCl来配8M尿素，对复性有影响吗？

不知道你能否提供相应的参考文献或者书目给我，我再仔细看看。

大提柱式DNA清除剂技术回答：

1）包含体在-20度或-70度保存较好，包含体状态的蛋白稳定性好，一但复性成功，溶液状态的蛋白容易被降解。PMSF，是蛋白酶抑制剂，应该对目的蛋白影响不大。我原来做实验时一般不加PMSF，加与不加看你的蛋白的稳定性。

2）洗涤上清和沉淀是指用尿素洗涤细胞裂解产物离心后的沉淀，用tip挑一点沉淀后用1倍的loading buffer重悬，与其他样品一起煮后电泳。从洗涤上清和沉淀的电泳情况可以看出目的蛋白的损失情况和杂蛋白的去除情况，大提柱式DNA清除剂选择一个合适的洗涤条件有时对纯化和得率很重要。

3）用Tris配尿素，OK! 

 基因组DNA提取系列

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