数量：大量
保质期：一年
保存条件：4℃保存
规格：5次
其主要特点是：
1. 大规模提取，一次可以提取到80-100 μg的动物总RNA。
2. 操作简单快速，整个过程只需要不到二十分钟（对一个样品而言）。
3. RNA纯度更高，OD260/OD280一般在2.0左右。
4. 一般不含有电泳可以检测到的基因组DNA污染。
5. 适用于培养细胞、大部分动物组织和部分植物组织。
6. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。

我准备按照你提供的基本程序尝试一次。大提柱式动物RNAOUT还需要问的问题是：

1.洗涤包含体，实际上就是洗涤细胞裂解液离心后的沉淀，对吗？我将沉淀-20度保存，应该没有什么影响吧？另外，我看到有的包含体洗涤液配方中含有PMSF，是蛋白酶抑制剂，它是否对目的蛋白有影响呢？

2.尿素洗涤包含体，洗涤上清和沉淀分别进行SDS-PAGE，得到一个收率和纯度*佳的尿素浓度。大提柱式动物RNAOUT洗涤上清和沉淀是指用尿素洗涤细胞裂解沉淀的吗？但不溶的沉淀能跑SDS-PAGE吗？这个收率和纯度是指洗涤后溶液里面浸出的目的蛋白吗？

3.我表达的目的蛋白是分解底物释放无机磷酸盐的一种水解酶，不适合用含有磷酸盐的PBS溶液来洗涤和缓冲，而是用Tris-HCl来洗涤和缓冲的。那我用Tris-HCl来配8M尿素，对复性有影响吗？

不知道你能否提供相应的参考文献或者书目给我，我再仔细看看。

大提柱式动物RNAOUT技术回答：

1）包含体在-20度或-70度保存较好，包含体状态的蛋白稳定性好，一但复性成功，溶液状态的蛋白容易被降解。PMSF，是蛋白酶抑制剂，应该对目的蛋白影响不大。我原来做实验时一般不加PMSF，加与不加看你的蛋白的稳定性。

2）洗涤上清和沉淀是指用尿素洗涤细胞裂解产物离心后的沉淀，用tip挑一点沉淀后用1倍的loading buffer重悬，与其他样品一起煮后电泳。从洗涤上清和沉淀的电泳情况可以看出目的蛋白的损失情况和杂蛋白的去除情况，大提柱式动物RNAOUT选择一个合适的洗涤条件有时对纯化和得率很重要。

3）用Tris配尿素，OK! 

 优化组合类系列

ZM101-1DNA MarkerⅠ（条带100.200.300.400.500.600）50TZOMANBIO

ZM101-2DNA MarkerⅠ（条带100.200.300.400.500.600）500TZOMANBIO

ZM102-1DNA Marker Ⅱ（条带100.300.500.700.900.1200）50TZOMANBIO

ZM102-2DNA Marker Ⅱ（条带100.300.500.700.900.1200）500TZOMANBIO

ZM103-1DNA Marker Ⅲ（条带300.500.800.1500.2000.3000.5000）50TZOMANBIO

ZM103-2DNA Marker Ⅲ（条带300.500.800.1500.2000.3000.5000）500TZOMANBIO

ZM104-1DNA Marker Ⅳ（条带500.1000.1500.3000.5000.8000）50TZOMANBIO

ZM104-2DNA Marker Ⅳ（条带500.1000.1500.3000.5000.8000）500TZOMANBIO

ZM105-1DNA Marker Ⅴ（条带200.400.700.1000.1500.2000）50TZOMANBIO

ZM105-2DNA Marker Ⅴ（条带200.400.700.1000.1500.2000）500TZOMANBIO

ZM106-1DNA MarkerⅥ(条带250.1000.2500.5000.7000.10000)50TZOMANBIO

ZM106-2DNA MarkerⅥ(条带250.1000.2500.5000.7000.10000)500TZOMANBIO

ZM107-1DNA Marker Ⅶ（条带300.500.1000.1500.2000.2500）50TZOMANBIO

ZM107-2DNA Marker Ⅶ（条带300.500.1000.1500.2000.2500）500TZOMANBIO

ladder marker系列

ZM201-150bp DNA Marker（条带50.100.150.200.250.300.250.400）50TZOMANBIO