数量：大量
保质期：一年
保存条件：常温
规格：30次

我准备按照你提供的基本程序尝试一次。粪便DNAOUT还需要问的问题是：

1.洗涤包含体，实际上就是洗涤细胞裂解液离心后的沉淀，对吗？我将沉淀-20度保存，应该没有什么影响吧？另外，我看到有的包含体洗涤液配方中含有PMSF，是蛋白酶抑制剂，它是否对目的蛋白有影响呢？

2.尿素洗涤包含体，洗涤上清和沉淀分别进行SDS-PAGE，得到一个收率和纯度*佳的尿素浓度。粪便DNAOUT洗涤上清和沉淀是指用尿素洗涤细胞裂解沉淀的吗？但不溶的沉淀能跑SDS-PAGE吗？这个收率和纯度是指洗涤后溶液里面浸出的目的蛋白吗？

3.我表达的目的蛋白是分解底物释放无机磷酸盐的一种水解酶，不适合用含有磷酸盐的PBS溶液来洗涤和缓冲，而是用Tris-HCl来洗涤和缓冲的。那我用Tris-HCl来配8M尿素，对复性有影响吗？

不知道你能否提供相应的参考文献或者书目给我，我再仔细看看。

粪便DNAOUT技术回答：

1）包含体在-20度或-70度保存较好，包含体状态的蛋白稳定性好，一但复性成功，溶液状态的蛋白容易被降解。PMSF，是蛋白酶抑制剂，应该对目的蛋白影响不大。我原来做实验时一般不加PMSF，加与不加看你的蛋白的稳定性。

2）洗涤上清和沉淀是指用尿素洗涤细胞裂解产物离心后的沉淀，用tip挑一点沉淀后用1倍的loading buffer重悬，与其他样品一起煮后电泳。从洗涤上清和沉淀的电泳情况可以看出目的蛋白的损失情况和杂蛋白的去除情况，粪便DNAOUT选择一个合适的洗涤条件有时对纯化和得率很重要。

3）用Tris配尿素，OK! 

 R6831-01MicroElute RNA Kit(50)

R6831-02MicroElute RNA Kit(200)

96孔组织RNA提取试剂盒：一次高通量地从动物组织或固定样品中提取96个样品的RNA

R1088-01Tissue RNA Kit(2x96)

R1088-02Tissue RNA Kit(8x96)

组织RNA提取试剂盒：从难裂解的动物组织、固定样品中提取总RNA

R6688-01Tissue RNA Kit(50)

R6688-02Tissue RNA Kit(200)

血液总RNA中量提取试剂盒：从小于10ml新鲜血液样品中提取10-50ug总RNA

R6615-00Blood RNA Midi Kit(2)

R6615-01Blood RNA Midi Kit(10)

R6615-02Blood RNA Midi Kit(25)

血液总RNA大量提取试剂盒：从小于50ml新鲜血液样品中提510-250ug总RNA

R6616-01Blood RNA Maxi Kit(5)

R6616-02Blood RNA Maxi Kit(20)

血液RNA小量提取试剂盒：从小于1ml新鲜血液中纯化3-10ug总RNA

R6814-00Blood RNA Kit(5)

R6814-01Blood RNA Kit(50)

R6814-02Blood RNA Kit(200)

软体动物RNA提取试剂盒：从软体动物、节肢动物、扁形虫等低等脊椎动物组织中提取RNA

R6875-00Molluse RNA Kit(5)

R6875-01Molluse RNA Kit(50)