两栖和爬行类动物种属鉴定PCR MIX(线粒体CO1基因）

 数量：大量
保质期：有效期一年
保存条件：-20℃保存
规格：100次

两栖和爬行类动物种属鉴定PCR MIX(线粒体CO1基因）添加DMSO或者使用修饰化的碱基以及使用LA－Taq来扩增PCR这些在我也都做过，不过都正如你所说，都是直接扩增基因组或cDNA.

而高GC含量影响反转录也是肯定的，因为高GC肯定容易形成复杂的二级结构，这些可以参见《分子克隆》。“我至今没有听说高GC含量会不利于逆转录，有一个证据就是在FMDV基因组RNA中有长达500bp的GC tail，两栖和爬行类动物种属鉴定PCR MIX(线粒体CO1基因）这个病毒的全基因组一样被测序出来”，但这并不能说明逆转录没有遇到麻烦，人家不会告诉你经过怎样的过程才测出来的。比如，对高GC含量的模板测序会比较困难吧，可是你到网上搜一搜，高GC含量的区域多的是，不然的话我也不无法预测我的基因5‘端有一个高GC区了是吗？我们不能因此就推出GC含量高不影响测序吧？我自己的例子也证明了高GC含量影响逆转录的，因为无论是筛库还是RACE，都是只能拿到此区域的相邻3’区，而可以肯定的是，所得到的一定不是全长，可见肯定是由于逆转录不过去。在搜一下文献，可以得出我的结论的。所以我现在的困难在于反转录，而不是PCR。

两栖和爬行类动物种属鉴定PCR MIX(线粒体CO1基因）首先检查一下你的基因片断大小以及回收量（应该不是很大，所以回收的量很可能太少），太小的片断不容易连，如果是这样建议使用好的感受态，或增大回收的量。其次看一下你回收时所用的紫外，波长是否小于314nm，如果是建议使用314以上的，并且操作时间尽量减短。第三，建议将回收产物普通Taq加A，不需回收，再连一次。*后，检查一下感受态。还有，如果T－easy存放时间过长，建议使用新的。 

难度不出很大。两栖和爬行类动物种属鉴定PCR MIX(线粒体CO1基因）如果诱变的位点在基因中间，你可以用一个突变引物先引入突变；然后用这个突变体做一侧的引物（大引物），与另一个引物一起，以野生型基因为模板扩增。我们用这种方法做出来多个突变体。

 PDR043Buffer CP, 500ml

PDR044DNA Wash Buffer Concentrate, 40ml

PDR045SPW Wash Buffer Concentrate, 25ml

PDR046RWB Wash Buffer Concentrate, 20ml

PDR047Buffer DP, 100ml

PDR048Elution Buffer, 100ml

PDR049Poly-Gel DNA Elution Buffer, 100ml

PDR050Buffer RFE, 100ml

基因组DNA相关溶液

PD061Buffer TL,100ml

PD062Buffer BL,100ml

PD063Buffer STL,100ml

PD064Buffer BDL,100ml

PD065Buffer BTL,200ml

PD066Buffer YL,100ml

PD067Buffer MTL,100ml

PD068Buffer YDL,100ml

PD069Buffer ERL,100ml

PD070Buffer MSL,100ml

PD071Buffer NL,100ml