小麦ZEIN基因PCR引物

 数量：大量
保质期：有效期一年
保存条件：-20℃保存
规格：100uL

小麦ZEIN基因PCR引物添加DMSO或者使用修饰化的碱基以及使用LA－Taq来扩增PCR这些在我也都做过，不过都正如你所说，都是直接扩增基因组或cDNA.

而高GC含量影响反转录也是肯定的，因为高GC肯定容易形成复杂的二级结构，这些可以参见《分子克隆》。“我至今没有听说高GC含量会不利于逆转录，有一个证据就是在FMDV基因组RNA中有长达500bp的GC tail，小麦ZEIN基因PCR引物这个病毒的全基因组一样被测序出来”，但这并不能说明逆转录没有遇到麻烦，人家不会告诉你经过怎样的过程才测出来的。比如，对高GC含量的模板测序会比较困难吧，可是你到网上搜一搜，高GC含量的区域多的是，不然的话我也不无法预测我的基因5‘端有一个高GC区了是吗？我们不能因此就推出GC含量高不影响测序吧？我自己的例子也证明了高GC含量影响逆转录的，因为无论是筛库还是RACE，都是只能拿到此区域的相邻3’区，而可以肯定的是，所得到的一定不是全长，可见肯定是由于逆转录不过去。在搜一下文献，可以得出我的结论的。所以我现在的困难在于反转录，而不是PCR。

小麦ZEIN基因PCR引物首先检查一下你的基因片断大小以及回收量（应该不是很大，所以回收的量很可能太少），太小的片断不容易连，如果是这样建议使用好的感受态，或增大回收的量。其次看一下你回收时所用的紫外，波长是否小于314nm，如果是建议使用314以上的，并且操作时间尽量减短。第三，建议将回收产物普通Taq加A，不需回收，再连一次。*后，检查一下感受态。还有，如果T－easy存放时间过长，建议使用新的。 

难度不出很大。小麦ZEIN基因PCR引物如果诱变的位点在基因中间，你可以用一个突变引物先引入突变；然后用这个突变体做一侧的引物（大引物），与另一个引物一起，以野生型基因为模板扩增。我们用这种方法做出来多个突变体。

 PD072Buffer XL,100ml

PD073Buffer SP1,250ml

PD074Buffer SP2, 60ml

PD075Buffer SP3, 100ml

PD076Buffer  P1, 250ml

PD077Buffer P2, 60ml

PD078Buffer P3, 100ml

PD079Buffer CPL, 100ml

PD080Buffer CXD, 100ml

PD081Buffer SFG1, 250ml

PD082Buffer SFG2, 60ml

PD083Buffer SFG3, 100ml

PD084Buffer FG1, 250ml

PD085Buffer FG2, 60ml

PD086Buffer FG3, 100ml

北京天恩泽基因科技有限公司