JM83大肠杆菌
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检测试剂盒
- 牛Elisa试剂盒
- 马Elisa试剂盒
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- 小鼠检测试剂盒/Mouse
- 猪检测试剂盒/Porcine
- 大鼠检测试剂盒/Rat
- 人检测试剂盒/Human
抗体
蛋白/多肽/抗原
原代细胞
细胞系
分子生物学
生化试剂
标准品/对照品
详细内容
JM83大肠杆菌
数量:大量
保质期:一年
保存条件:-80℃保存
规格:1 管
JM83大肠杆菌添加DMSO或者使用修饰化的碱基以及使用LA-Taq来扩增PCR这些在我也都做过,不过都正如你所说,都是直接扩增基因组或cDNA.
而高GC含量影响反转录也是肯定的,因为高GC肯定容易形成复杂的二级结构,这些可以参见《分子克隆》。“我至今没有听说高GC含量会不利于逆转录,有一个证据就是在FMDV基因组RNA中有长达500bp的GC tail,JM83大肠杆菌这个病毒的全基因组一样被测序出来”,但这并不能说明逆转录没有遇到麻烦,人家不会告诉你经过怎样的过程才测出来的。比如,对高GC含量的模板测序会比较困难吧,可是你到网上搜一搜,高GC含量的区域多的是,不然的话我也不无法预测我的基因5‘端有一个高GC区了是吗?我们不能因此就推出GC含量高不影响测序吧?我自己的例子也证明了高GC含量影响逆转录的,因为无论是筛库还是RACE,都是只能拿到此区域的相邻3’区,而可以肯定的是,所得到的一定不是全长,可见肯定是由于逆转录不过去。在搜一下文献,可以得出我的结论的。所以我现在的困难在于反转录,而不是PCR。
JM83大肠杆菌首先检查一下你的基因片断大小以及回收量(应该不是很大,所以回收的量很可能太少),太小的片断不容易连,如果是这样建议使用好的感受态,或增大回收的量。其次看一下你回收时所用的紫外,波长是否小于314nm,如果是建议使用314以上的,并且操作时间尽量减短。第三,建议将回收产物普通Taq加A,不需回收,再连一次。*后,检查一下感受态。还有,如果T-easy存放时间过长,建议使用新的。
难度不出很大。JM83大肠杆菌如果诱变的位点在基因中间,你可以用一个突变引物先引入突变;然后用这个突变体做一侧的引物(大引物),与另一个引物一起,以野生型基因为模板扩增。我们用这种方法做出来多个突变体。
ZS201RNA上样缓冲液(6×)120ulZOMANBIO
ZS202DNA上样缓冲液(6×Ⅳ)1mlZOMANBIO
ZS203Zoman-Green (EB升级换代产品)1mlZOMANBIO
ZS204EB/溴化乙锭(10mg/ml)1mlZOMANBIO
ZS205-1TAE电泳缓冲液(50×)100mlZOMANBIO
ZS205-2TAE电泳缓冲液(50×)250mlZOMANBIO
ZS205-3TAE电泳缓冲液(50×)500mlZOMANBIO
ZS206TBE电泳缓冲液(5×)250mlZOMANBIO
ZS207TAE电泳缓冲液RNA专用(50×)100mlZOMANBIO
蛋白质研究相关试剂
ZS301蛋白标准(5mg/ml BSA)1mlZOMANBIO
ZS302
ZS303PMSF(100mM)1mlZOMANBIO
ZS3045×tris-甘氨酸电泳缓冲液250mlZOMANBIO