数量：大量
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规格：1 管

C43(DE3)大肠杆菌添加DMSO或者使用修饰化的碱基以及使用LA－Taq来扩增PCR这些在我也都做过，不过都正如你所说，都是直接扩增基因组或cDNA.

而高GC含量影响反转录也是肯定的，因为高GC肯定容易形成复杂的二级结构，这些可以参见《分子克隆》。“我至今没有听说高GC含量会不利于逆转录，有一个证据就是在FMDV基因组RNA中有长达500bp的GC tail，C43(DE3)大肠杆菌这个病毒的全基因组一样被测序出来”，但这并不能说明逆转录没有遇到麻烦，人家不会告诉你经过怎样的过程才测出来的。比如，对高GC含量的模板测序会比较困难吧，可是你到网上搜一搜，高GC含量的区域多的是，不然的话我也不无法预测我的基因5‘端有一个高GC区了是吗？我们不能因此就推出GC含量高不影响测序吧？我自己的例子也证明了高GC含量影响逆转录的，因为无论是筛库还是RACE，都是只能拿到此区域的相邻3’区，而可以肯定的是，所得到的一定不是全长，可见肯定是由于逆转录不过去。在搜一下文献，可以得出我的结论的。所以我现在的困难在于反转录，而不是PCR。

C43(DE3)大肠杆菌首先检查一下你的基因片断大小以及回收量（应该不是很大，所以回收的量很可能太少），太小的片断不容易连，如果是这样建议使用好的感受态，或增大回收的量。其次看一下你回收时所用的紫外，波长是否小于314nm，如果是建议使用314以上的，并且操作时间尽量减短。第三，建议将回收产物普通Taq加A，不需回收，再连一次。*后，检查一下感受态。还有，如果T－easy存放时间过长，建议使用新的。 

难度不出很大。C43(DE3)大肠杆菌如果诱变的位点在基因中间，你可以用一个突变引物先引入突变；然后用这个突变体做一侧的引物（大引物），与另一个引物一起，以野生型基因为模板扩增。我们用这种方法做出来多个突变体。

 R6840-01Fungal RNA Kit(50)

R6840-02Fungal RNA Kit(200)

RNA保护液：保护组织或细胞在12个月内中总RNA不发生降解

R0424-01RNAsafer Stabilizer Reagent(50ml)

R0424-02RNAsafer Stabilizer Reagent(250ml)

R5465-01RNAsafer II Stabilizer Reagent(50ml)

R5465-02RNAsafer II Stabilizer Reagent(100ml)

SQ 总RNA提取试剂盒

R3053-001x108 Cells, 0.5g Tissue

R3053-051x109 Cells, 5g Tissue

R3053-406.7 x109 Cells, 40g Tissue

一步法RNA提取试剂盒：用传统三相分离法从动物组织/培养细胞中纯化总RNA