SURE大肠杆菌
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检测试剂盒
- 牛Elisa试剂盒
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抗体
蛋白/多肽/抗原
原代细胞
细胞系
分子生物学
生化试剂
标准品/对照品
详细内容
SURE大肠杆菌
数量:大量
保质期:一年
保存条件:-80℃保存
规格:1 管
SURE大肠杆菌添加DMSO或者使用修饰化的碱基以及使用LA-Taq来扩增PCR这些在我也都做过,不过都正如你所说,都是直接扩增基因组或cDNA.
而高GC含量影响反转录也是肯定的,因为高GC肯定容易形成复杂的二级结构,这些可以参见《分子克隆》。“我至今没有听说高GC含量会不利于逆转录,有一个证据就是在FMDV基因组RNA中有长达500bp的GC tail,SURE大肠杆菌这个病毒的全基因组一样被测序出来”,但这并不能说明逆转录没有遇到麻烦,人家不会告诉你经过怎样的过程才测出来的。比如,对高GC含量的模板测序会比较困难吧,可是你到网上搜一搜,高GC含量的区域多的是,不然的话我也不无法预测我的基因5‘端有一个高GC区了是吗?我们不能因此就推出GC含量高不影响测序吧?我自己的例子也证明了高GC含量影响逆转录的,因为无论是筛库还是RACE,都是只能拿到此区域的相邻3’区,而可以肯定的是,所得到的一定不是全长,可见肯定是由于逆转录不过去。在搜一下文献,可以得出我的结论的。所以我现在的困难在于反转录,而不是PCR。
SURE大肠杆菌首先检查一下你的基因片断大小以及回收量(应该不是很大,所以回收的量很可能太少),太小的片断不容易连,如果是这样建议使用好的感受态,或增大回收的量。其次看一下你回收时所用的紫外,波长是否小于314nm,如果是建议使用314以上的,并且操作时间尽量减短。第三,建议将回收产物普通Taq加A,不需回收,再连一次。*后,检查一下感受态。还有,如果T-easy存放时间过长,建议使用新的。
难度不出很大。SURE大肠杆菌如果诱变的位点在基因中间,你可以用一个突变引物先引入突变;然后用这个突变体做一侧的引物(大引物),与另一个引物一起,以野生型基因为模板扩增。我们用这种方法做出来多个突变体。
81104-1000 超快核酸银染试剂盒 1000ml
100603-30 银染清除剂 30次
3092-100 溴化乙锭清除剂 100次
100808-1 溴化乙锭干粉 1g
3180-1.5 溴化乙锭溶液 1.5ml
分子量标准
70503DNA电泳分子量标准系列 50次
90602DNA电泳分子量标准系列(2) 50次
90101-50 大片段DNA分子量标准 50ug
70605-30 miRNA电泳分子量标准 30次
沉淀剂及助沉剂
3120-0.1 微量RNA助沉剂 0.1ml
3621-0.1 微量DNA助沉剂 0.1ml
50903-10 微量核酸沉淀剂 10ml
60402-30 超快非醇核酸沉淀剂 30次
60402-100 超快非醇核酸沉淀剂 100次
DNA纯化回收
60202-50 柱式DNAback 50次