裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒(无高效转化液)
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检测试剂盒
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抗体
蛋白/多肽/抗原
原代细胞
细胞系
分子生物学
生化试剂
标准品/对照品
详细内容
数量:大量
保质期:一年
保存条件:常温
规格:20次
本裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理,高效快速制备裂殖酵母化学感受态细胞,用于长期冻存以备后续转化的产品,它具有下列特点:1. 一次制备,-80℃保存,多次使用,免去每次转化都要制备裂殖酵母感受态细胞。2. 操作简单,单溶液制备,除酵母培养的时间外,整个操作只需要30分钟。3. 主要用于裂殖酵母S. pombe,其他多种实验用酵母菌株选用酵母化学感受态细胞制备试剂(CAT#:81109)。4. 受体酵母可以不含质粒,也可用于携带有选择性质粒的酵母(如双杂交体系中的酵母)。5. 转化效率可达到0.2-1×105个转化子/ μg质粒DNA。6. 得到的感受态细胞可以用各种线性或环状酵母穿梭质粒DNA进行转化,例如YIp,YRp,YCp,YEp和YAC等。7. 可以用于酵母双杂交、定点突变(Site-Directed Mutagenesis)、基因破坏(Gene Disruption)、等位突变基因修复(Mutant Allele Recovery)等实验。8. 本产品可以制备20只裂殖酵母感受态细胞(需要100mL裂殖酵母培养液),其中A型只用于制备感受态细胞,B型还带高效转化液。
酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒(无高效转化液)传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出,表达量则常常超过大肠杆菌系统,如果实现高效分泌表达,则纯化成本非常低,具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。
裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒(无高效转化液)除了用于规模化生产重组蛋白之外,毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用,比如表达蛋白用于结构分析,信号传导途径研究,当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少,一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。
如果需要,完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索,从以往的战绩来看,毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了,裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒(无高效转化液)比例也很高,虽然仍存在风险。
1)原核诱导时间,从你的结果来看,诱导1-5小时变化不大,时间点影响较小,取3小时没有问题。很多情况下,温度对可溶性影响较大,不知道你30度诱导的可溶性如何?如果蛋白主要是可溶性的,那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体,裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒(无高效转化液)倒是可以再降低一下诱导温度。此外,很多蛋白包含体复性后有活性,如果可溶性表达困难或表达量太低,仍可以考虑包含体复性策略。
2)酵母细胞的破壁可以采用机械法,也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨,主要用于中试和生产,但有的仪器也可以兼顾实验室规模,这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体,是一种外源基因高效转化的方法,裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒(无高效转化液)但用于破壁检测表达则成本太高,此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献,是小量裂截用于表达检测的,我没有直接作过,但我们实验室的研究生反映还可以。
ZI111-2豚鼠 IgG 50mgZOMANBIO
ZI112-1豚鼠 IgG (液体-Ph 7.2 PBS)10mg/mlZOMANBIO
ZI112-2豚鼠 IgG (液体-Ph 7.2 PBS)50mg/2-3mlZOMANBIO
ZI113-1猪 IgG 10mgZOMANBIO
ZI113-2猪 IgG 50mgZOMANBIO
ZI113-3猪 IgG 100mgZOMANBIO
ZI113-4猪 IgG 1000mgZOMANBIO
ZI114-1猪 IgG( 液体-Ph 7.2 PBS ) 10mg/mlZOMANBIO
ZI114-2猪 IgG( 液体-Ph 7.3 PBS )50mg/2-3mlZOMANBIO
ZI114-3猪 IgG( 液体-Ph 7.4 PBS )100mg/2-5mlZOMANBIO
ZI115-1牛 IgG 10mgZOMANBIO
ZI115-2牛 IgG 50mgZOMANBIO
ZI115-3牛 IgG 100mgZOMANBIO