数量：大量
保质期：两年
保存条件：-20℃保存
规格：20µL
本产品是用HRP（辣根过氧化酶）标记的、抗GST标签蛋白的兔多克隆抗体，用于检测细菌、酵母或昆虫细胞表达的、带GST的重组蛋白，用于表达纯化过程中追踪重组蛋白的完整性和回收率。多克隆抗体是用亲和层析的方法制备，然后体外与HRP偶联。带本产品具有下列特点：1. 抗体带有HRP，不再需要二抗。2. 专一性强，只识别N-端或C-端带GST标签的重组蛋白。也可以识别天然的含连续六个GST序列的蛋白质。3. 可以用于Western Blot和免疫组化（一般需要稀释50-2000倍使用）、ELISA（一般需要稀释200-5000倍使用）。4. 抗体与HRP共价偶联，非常稳定。

酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。HRP标记的兔抗GST标签多抗传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出，表达量则常常超过大肠杆菌系统，如果实现高效分泌表达，则纯化成本非常低，具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。

HRP标记的兔抗GST标签多抗除了用于规模化生产重组蛋白之外，毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用，比如表达蛋白用于结构分析，信号传导途径研究，当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少，一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。

如果需要，完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索，从以往的战绩来看，毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了，HRP标记的兔抗GST标签多抗比例也很高，虽然仍存在风险。

1）原核诱导时间，从你的结果来看，诱导1-5小时变化不大，时间点影响较小，取3小时没有问题。很多情况下，温度对可溶性影响较大，不知道你30度诱导的可溶性如何？如果蛋白主要是可溶性的，那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体，HRP标记的兔抗GST标签多抗倒是可以再降低一下诱导温度。此外，很多蛋白包含体复性后有活性，如果可溶性表达困难或表达量太低，仍可以考虑包含体复性策略。

2）酵母细胞的破壁可以采用机械法，也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨，主要用于中试和生产，但有的仪器也可以兼顾实验室规模，这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体，是一种外源基因高效转化的方法，HRP标记的兔抗GST标签多抗但用于破壁检测表达则成本太高，此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献，是小量裂截用于表达检测的，我没有直接作过，但我们实验室的研究生反映还可以。

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