改良Lowry法蛋白定量试剂盒
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细胞系
分子生物学
生化试剂
标准品/对照品
详细内容
改良LOWRY法蛋白定量试剂盒
数量:大量
保质期:两年
保存条件:常温保存,BSA标准需要-20℃保存
规格:1000次
Folin酚试剂(磷钼酸和磷钨酸混合物)跟蛋白质中含酚氨基酸(色氨酸和酪氨酸)发生颜色反应,可用于测定蛋白质浓度,但灵敏度较低。Lowry在此基础上加入Biuret(双缩脲)反应步骤,即先在碱性条件下使蛋白质和Cu+形成复合物,再使其与Folin酚试剂发生显色反应,产物在750nm检测。Lowry法使不含酚的蛋白质也能被检测出来,灵敏度是单独使用Folin酚的10倍左右,是双缩脲反应的200倍,因此成为早期检测蛋白浓度的主要方法。传统Lowry法受到很多常用的试剂(如DTT、糖、甘油、Triton等)干扰,步骤繁琐。本公司对Lowry法进行改良,推出本产品,它具有下列特点:1. 即开即用,不需要单独购买每个成分再配制。2. 可室温操作,适合高通量定量,只需要三种溶液(经典Lowry法需5种溶液)。3. 检测线性范围广,在2-100 μg,检测上限比经典Lowry法高30%-40%。4. 可排除去污剂的影响。
酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。改良LOWRY法蛋白定量试剂盒传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出,表达量则常常超过大肠杆菌系统,如果实现高效分泌表达,则纯化成本非常低,具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。
改良LOWRY法蛋白定量试剂盒除了用于规模化生产重组蛋白之外,毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用,比如表达蛋白用于结构分析,信号传导途径研究,当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少,一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。
如果需要,完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索,从以往的战绩来看,毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了,改良LOWRY法蛋白定量试剂盒比例也很高,虽然仍存在风险。
1)原核诱导时间,从你的结果来看,诱导1-5小时变化不大,时间点影响较小,取3小时没有问题。很多情况下,温度对可溶性影响较大,不知道你30度诱导的可溶性如何?如果蛋白主要是可溶性的,那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体,改良LOWRY法蛋白定量试剂盒倒是可以再降低一下诱导温度。此外,很多蛋白包含体复性后有活性,如果可溶性表达困难或表达量太低,仍可以考虑包含体复性策略。
2)酵母细胞的破壁可以采用机械法,也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨,主要用于中试和生产,但有的仪器也可以兼顾实验室规模,这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体,是一种外源基因高效转化的方法,改良LOWRY法蛋白定量试剂盒但用于破壁检测表达则成本太高,此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献,是小量裂截用于表达检测的,我没有直接作过,但我们实验室的研究生反映还可以。
R6812-02HP Total RNA Kit(200)
磁珠RNA提取试剂盒:
M6930-01Mag-Bind Total RNA Kit(50)
M6930-02Mag-Bind Total RNA Kit(200)
微量RNA提取试剂盒:从微量细胞或组织中提取总RNA
R6831-00MicroElute RNA Kit(5)
R6831-01MicroElute RNA Kit(50)
R6831-02MicroElute RNA Kit(200)
96孔组织RNA提取试剂盒:一次高通量地从动物组织或固定样品中提取96个样品的RNA
R1088-01Tissue RNA Kit(2x96)
R1088-02Tissue RNA Kit(8x96)
组织RNA提取试剂盒:从难裂解的动物组织、固定样品中提取总RNA