数量：大量
保质期：一年
保存条件：常温保存（溶菌酶需要-20℃保存）
规格：2次
本产品是包涵体微量纯化试剂盒（CAT#：90508）的大提升级产品，用于大量，快速的提取高质量的包涵体。它具有下列特点：1. 大量提取，1次可处理多达5升的菌液，相当于50次中量提取。2. 适合制备级别的包涵体纯化，需在50 mL以上的离心管或离心瓶中完成。3. 能有效去除包涵体中的细胞壁和细胞膜等非重组蛋白成份，使重组蛋白在包涵体中所占比重达到60%以上。4. 即可以选择高压裂解法，也可以采用酶学裂解法裂解细菌。5. 得到的包涵体可以用于重折叠，也可以用于凝胶层析和动物免疫。

酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。包涵体大量纯化试剂盒传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出，表达量则常常超过大肠杆菌系统，如果实现高效分泌表达，则纯化成本非常低，具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。

包涵体大量纯化试剂盒除了用于规模化生产重组蛋白之外，毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用，比如表达蛋白用于结构分析，信号传导途径研究，当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少，一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。

如果需要，完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索，从以往的战绩来看，毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了，包涵体大量纯化试剂盒比例也很高，虽然仍存在风险。

1）原核诱导时间，从你的结果来看，诱导1-5小时变化不大，时间点影响较小，取3小时没有问题。很多情况下，温度对可溶性影响较大，不知道你30度诱导的可溶性如何？如果蛋白主要是可溶性的，那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体，包涵体大量纯化试剂盒倒是可以再降低一下诱导温度。此外，很多蛋白包含体复性后有活性，如果可溶性表达困难或表达量太低，仍可以考虑包含体复性策略。

2）酵母细胞的破壁可以采用机械法，也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨，主要用于中试和生产，但有的仪器也可以兼顾实验室规模，这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体，是一种外源基因高效转化的方法，包涵体大量纯化试剂盒但用于破壁检测表达则成本太高，此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献，是小量裂截用于表达检测的，我没有直接作过，但我们实验室的研究生反映还可以。

 PR021TRK Lysis Buffer , 100ml

PR022QVL Lysis Buffer , 100ml

PR023Buffer ERL, 250ml

PR024Buffer YRL, 100 ml

PR025Buffer BRL, 100 ml

PR026Buffer RB, 100ml

PR027Buffer RPL, 100ml

PR028Buffer RFL, 100ml

PR029Buffer SP, 60ml

PR030RNA Wash Buffer I, 100ml

PR031RNA Wash Buffer II, 100ml

PR032DEPC-treated Water, 100ml

PR033Linear Acrylamide, 10ml