山羊抗小鼠IgG,荧光素488标记
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抗体
蛋白/多肽/抗原
原代细胞
细胞系
分子生物学
生化试剂
标准品/对照品
详细内容
数量:大量
保质期:一年
保存条件:4℃保存
规格:0.1mg
本产品是山羊抗小鼠IgG二抗,浓度为0. 5 mg/mL,是经亲和纯化并标记有荧光素488(Fluorescein 488)。IF488为近年来新开发的一种荧光素,较普通的荧光素具有较高的荧光强度和耐光性,在pH4-9的范围内均具有较高的荧光信号,被激发后产生明亮的红色荧光,吸收光谱为493nm,发射光谱为518nm。本抗体与所有的IgG 亚类反应,特异识别小鼠IgG,检测灵敏度高,本底低,对其他种属IgG 无明显交叉反应,常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。
酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。山羊抗小鼠IGG,荧光素488标记传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出,表达量则常常超过大肠杆菌系统,如果实现高效分泌表达,则纯化成本非常低,具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。
山羊抗小鼠IGG,荧光素488标记除了用于规模化生产重组蛋白之外,毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用,比如表达蛋白用于结构分析,信号传导途径研究,当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少,一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。
如果需要,完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索,从以往的战绩来看,毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了,山羊抗小鼠IGG,荧光素488标记比例也很高,虽然仍存在风险。
1)原核诱导时间,从你的结果来看,诱导1-5小时变化不大,时间点影响较小,取3小时没有问题。很多情况下,温度对可溶性影响较大,不知道你30度诱导的可溶性如何?如果蛋白主要是可溶性的,那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体,山羊抗小鼠IGG,荧光素488标记倒是可以再降低一下诱导温度。此外,很多蛋白包含体复性后有活性,如果可溶性表达困难或表达量太低,仍可以考虑包含体复性策略。
2)酵母细胞的破壁可以采用机械法,也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨,主要用于中试和生产,但有的仪器也可以兼顾实验室规模,这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体,是一种外源基因高效转化的方法,山羊抗小鼠IGG,荧光素488标记但用于破壁检测表达则成本太高,此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献,是小量裂截用于表达检测的,我没有直接作过,但我们实验室的研究生反映还可以。
RNA纯化回收
80204-50 柱式RNAclean 50次
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80203-50 柱式miRNAback 50次
其它
60601-3 DNA UV防护剂 3g
100876-250 丙烯酰胺干粉 250g
100877-25 甲叉双丙烯酰胺干粉 25g
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100880-30 TEMED 30ml
100881-100 10%SDS溶液,电泳级 100ml
81105-100 琼脂糖 100g