银染清除剂
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抗体
蛋白/多肽/抗原
原代细胞
细胞系
分子生物学
生化试剂
标准品/对照品
详细内容
数量:大量
保质期:一年
保存条件:常温保存
规格:30次
银染是目前*灵敏的非同位素PAGE胶蛋白质染色技术,对银染后的条带进行原位酶切(in-gel digestion)和后续MS分析是蛋白组学研究的重要手段。大量研究表明如果预先对银染条带进行去除银粒子的处理,则原位酶切更加有效,MS灵敏度更高。目前*常用的脱银粒子清除方法(如铁氰酸钾/硫代硫酸钠法、硫酸铜/硫代硫酸钠法)的主要缺点是引入的金属离子会影响后续反应、有的成分还有毒性(如铁氰酸钾)、工作液极不稳定。为克服这些缺点,本公司开发了无毒环保的新型银粒子清除剂,它具有下列特点:1. 高效,5-10分钟处理即可清除PAGE胶中银染留下的银粒子。2. 成分不含金属离子,跟原位酶切和质谱分析(包括MALDI-TOF-MS)等后续反应高度兼容。3. 成分无毒环保,保障研究人员和环境的安全。4. 既可用于蛋白质银染后的脱银,也可用于核酸银染后的脱银。5. 即开即用,使用非常方便,不需要配制各种溶液。
酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。银染清除剂传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出,表达量则常常超过大肠杆菌系统,如果实现高效分泌表达,则纯化成本非常低,具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。
银染清除剂除了用于规模化生产重组蛋白之外,毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用,比如表达蛋白用于结构分析,信号传导途径研究,当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少,一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。
如果需要,完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索,从以往的战绩来看,毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了,银染清除剂比例也很高,虽然仍存在风险。
1)原核诱导时间,从你的结果来看,诱导1-5小时变化不大,时间点影响较小,取3小时没有问题。很多情况下,温度对可溶性影响较大,不知道你30度诱导的可溶性如何?如果蛋白主要是可溶性的,那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体,银染清除剂倒是可以再降低一下诱导温度。此外,很多蛋白包含体复性后有活性,如果可溶性表达困难或表达量太低,仍可以考虑包含体复性策略。
2)酵母细胞的破壁可以采用机械法,也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨,主要用于中试和生产,但有的仪器也可以兼顾实验室规模,这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体,是一种外源基因高效转化的方法,银染清除剂但用于破壁检测表达则成本太高,此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献,是小量裂截用于表达检测的,我没有直接作过,但我们实验室的研究生反映还可以。
ZI110-2大鼠 IgG (液体-Ph 7.3 PBS)50mg/2-3mlZOMANBIO
ZI111-1豚鼠 IgG 10mgZOMANBIO
ZI111-2豚鼠 IgG 50mgZOMANBIO
ZI112-1豚鼠 IgG (液体-Ph 7.2 PBS)10mg/mlZOMANBIO
ZI112-2豚鼠 IgG (液体-Ph 7.2 PBS)50mg/2-3mlZOMANBIO
ZI113-1猪 IgG 10mgZOMANBIO
ZI113-2猪 IgG 50mgZOMANBIO
ZI113-3猪 IgG 100mgZOMANBIO
ZI113-4猪 IgG 1000mgZOMANBIO
ZI114-1猪 IgG( 液体-Ph 7.2 PBS ) 10mg/mlZOMANBIO
ZI114-2猪 IgG( 液体-Ph 7.3 PBS )50mg/2-3mlZOMANBIO