数量：大量
保质期：一年
保存条件：4℃保存
规格：100次
细胞质是真核细胞活动的重要场所，很多与新陈代谢和信号传递的蛋白质都存在于细胞质中，这些蛋白就叫胞浆蛋白。本产品就是专门用于小量真核培养细胞中制备胞浆蛋白，它具有下列特点：1. 一步式操作，整个提取制备过程简便，只需要半小时。2. 实验重复性好，尤其适合同时处理多个样品。3. 可用于培养的动物细胞，也可以用于新鲜动物组织细胞。4. 温和裂解法，制备的胞浆蛋白能保持天然活性，可以直接用于活性检测、蛋白浓度测定、各种蛋白质电泳等后续研究。

酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出，表达量则常常超过大肠杆菌系统，如果实现高效分泌表达，则纯化成本非常低，具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。

一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒除了用于规模化生产重组蛋白之外，毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用，比如表达蛋白用于结构分析，信号传导途径研究，当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少，一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。

如果需要，完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索，从以往的战绩来看，毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了，一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒比例也很高，虽然仍存在风险。

1）原核诱导时间，从你的结果来看，诱导1-5小时变化不大，时间点影响较小，取3小时没有问题。很多情况下，温度对可溶性影响较大，不知道你30度诱导的可溶性如何？如果蛋白主要是可溶性的，那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体，一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒倒是可以再降低一下诱导温度。此外，很多蛋白包含体复性后有活性，如果可溶性表达困难或表达量太低，仍可以考虑包含体复性策略。

2）酵母细胞的破壁可以采用机械法，也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨，主要用于中试和生产，但有的仪器也可以兼顾实验室规模，这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体，是一种外源基因高效转化的方法，一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒但用于破壁检测表达则成本太高，此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献，是小量裂截用于表达检测的，我没有直接作过，但我们实验室的研究生反映还可以。

 90206-20 杂交袋 20个

其它

70104-125 无毒型可见光核酸印迹膜染液 125ml

第五章 核酸扩增系列

PCR成分及添加剂

51206-500 Taq DNA聚合酶 500U

51206-5000 Taq DNA聚合酶 5000U

90501-250 Tth DNA聚合酶 250U

100209-800 Bst DNA聚合酶（大片段） 800U

51207-100 Pfu DNA聚合酶 100U