数量：大量
保质期：一年
保存条件：4℃保存
规格：50mL
本产品含有多种细胞裂解成分和蛋白酶抑制成分，可以在非变性或变性条件下迅速裂解组织或培养细胞，使之释放出细胞内蛋白，用于后续实验。它具有以下优点：1. 快速裂解，多种裂解成分经过精心优化，能快速使细胞裂解。2. 非变性（80807A）产品能程度地保留蛋白天然结构和功能，适用于Western Blot、免疫沉淀、免疫共沉淀、蛋白活性检测（信号传递研究和酶动力学检测）等各种研究。3. 变性（80807B）裂解细胞的效率更高，适用于Western Blotting和对抗原空间构型不敏感的免疫共沉淀研究。4. 适用于培养细胞（包括悬浮细胞）和新鲜组织。

酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。动物细胞裂解液A（非变性）传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出，表达量则常常超过大肠杆菌系统，如果实现高效分泌表达，则纯化成本非常低，具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。

动物细胞裂解液A（非变性）除了用于规模化生产重组蛋白之外，毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用，比如表达蛋白用于结构分析，信号传导途径研究，当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少，一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。

如果需要，完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索，从以往的战绩来看，毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了，动物细胞裂解液A（非变性）比例也很高，虽然仍存在风险。

1）原核诱导时间，从你的结果来看，诱导1-5小时变化不大，时间点影响较小，取3小时没有问题。很多情况下，温度对可溶性影响较大，不知道你30度诱导的可溶性如何？如果蛋白主要是可溶性的，那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体，动物细胞裂解液A（非变性）倒是可以再降低一下诱导温度。此外，很多蛋白包含体复性后有活性，如果可溶性表达困难或表达量太低，仍可以考虑包含体复性策略。

2）酵母细胞的破壁可以采用机械法，也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨，主要用于中试和生产，但有的仪器也可以兼顾实验室规模，这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体，是一种外源基因高效转化的方法，动物细胞裂解液A（非变性）但用于破壁检测表达则成本太高，此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献，是小量裂截用于表达检测的，我没有直接作过，但我们实验室的研究生反映还可以。

 片段处理

60105-50 加A试剂盒 50次

60106-50 加T试剂盒 50次

60107-20 DNA粘转平试剂盒 20次

载体及感受态细胞

Feb-10克必隆G载体 2ug

51104-2 克必隆B载体 2ug

100944-2 克必隆U6载体 2ug

60803A  可保种型蓝白T载体 50ng

60803B  可保种型蓝白T载体 50ng