数量：大量
保质期：一年
保存条件：4℃保存
规格：100mL
Western Blot实验中，为防止印迹膜与检测系统中的蛋白成分（如抗体IgG等）发生非特异性吸附，导致实验结果不清晰，在进行一抗孵育前需预先对印迹膜上的非特异结合位点进行封闭。无蛋白封闭液可限度减少交叉反应引起的非特异性背景。本产品可快速高效地封闭膜上多余的结合部位，减少非特异结合情况的产生，降低背景，适用于各种转印膜的封闭。

酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。WESTERN印迹膜封膜液 (NC膜和PVDF膜)传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出，表达量则常常超过大肠杆菌系统，如果实现高效分泌表达，则纯化成本非常低，具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。

WESTERN印迹膜封膜液 (NC膜和PVDF膜)除了用于规模化生产重组蛋白之外，毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用，比如表达蛋白用于结构分析，信号传导途径研究，当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少，一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。

如果需要，完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索，从以往的战绩来看，毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了，WESTERN印迹膜封膜液 (NC膜和PVDF膜)比例也很高，虽然仍存在风险。

1）原核诱导时间，从你的结果来看，诱导1-5小时变化不大，时间点影响较小，取3小时没有问题。很多情况下，温度对可溶性影响较大，不知道你30度诱导的可溶性如何？如果蛋白主要是可溶性的，那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体，WESTERN印迹膜封膜液 (NC膜和PVDF膜)倒是可以再降低一下诱导温度。此外，很多蛋白包含体复性后有活性，如果可溶性表达困难或表达量太低，仍可以考虑包含体复性策略。

2）酵母细胞的破壁可以采用机械法，也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨，主要用于中试和生产，但有的仪器也可以兼顾实验室规模，这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体，是一种外源基因高效转化的方法，WESTERN印迹膜封膜液 (NC膜和PVDF膜)但用于破壁检测表达则成本太高，此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献，是小量裂截用于表达检测的，我没有直接作过，但我们实验室的研究生反映还可以。

 60603-1 即用型蓝白T载体 1ug

90601-2 EGFP-N3质粒 2ug

100401-2 EGFP-N1质粒 2ug

80501-2 IRES2-EGFP质粒 2ug

60104-2 pIRESpuro质粒 2ug

60908常用载体 2ug

90804-5 pBR322质粒 5ug

100402-2 pET28a质粒 2ug

100701-2 pET32a质粒 2ug

91001A-5 pUC18/pUC19质粒 5ug

91001B-5 pUC18/pUC19质粒 5ug

90407-50 λDNA 50ug

100817-200 MDS 42recA菌种 即将推出