DAPI干粉

 数量：大量
保质期：一年
保存条件：-20℃干燥避光保存
规格：10mg
DAPI（4＇,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride），CAS号：28718-90-3 ，分子式：C16H17Cl2N5，分子量：350.25。是一种常用的用于DNA染色的细胞核染色试剂，它在嵌入双链DNA后释放蓝色荧光。DAPI常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI-DNA复合物的激发和发射波长分别为360nm和460nm。本染色液可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。

酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。DAPI干粉传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出，表达量则常常超过大肠杆菌系统，如果实现高效分泌表达，则纯化成本非常低，具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。

DAPI干粉除了用于规模化生产重组蛋白之外，毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用，比如表达蛋白用于结构分析，信号传导途径研究，当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少，一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。

如果需要，完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索，从以往的战绩来看，毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了，DAPI干粉比例也很高，虽然仍存在风险。

1）原核诱导时间，从你的结果来看，诱导1-5小时变化不大，时间点影响较小，取3小时没有问题。很多情况下，温度对可溶性影响较大，不知道你30度诱导的可溶性如何？如果蛋白主要是可溶性的，那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体，DAPI干粉倒是可以再降低一下诱导温度。此外，很多蛋白包含体复性后有活性，如果可溶性表达困难或表达量太低，仍可以考虑包含体复性策略。

2）酵母细胞的破壁可以采用机械法，也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨，主要用于中试和生产，但有的仪器也可以兼顾实验室规模，这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体，是一种外源基因高效转化的方法，DAPI干粉但用于破壁检测表达则成本太高，此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献，是小量裂截用于表达检测的，我没有直接作过，但我们实验室的研究生反映还可以。

 ZI101-3人 IgG 100mgZOMANBIO

ZI101-4人 IgG 1000mgZOMANBIO

ZI102-1人 IgG ( 液体-Ph 7.2 PBS ) 10mg/mlZOMANBIO

ZI102-2人 IgG ( 液体-Ph 7.2PBS )50mg/mlZOMANBIO

ZI102-3人 IgG ( 液体-Ph 7.2 PBS )100mg/mlZOMANBIO

ZI103-1兔 IgG 10mgZOMANBIO

ZI103-2兔 IgG 50mgZOMANBIO

ZI103-3兔 IgG 100mgZOMANBIO

ZI103-4兔 IgG 1000mgZOMANBIO

ZI104-1兔 IgG ( 液体-Ph 7.2 PBS ) 10mg/mlZOMANBIO

ZI104-2兔 IgG ( 液体-Ph 7.2 PBS ) 50mg/2-3mlZOMANBIO

ZI104-3兔 IgG ( 液体-Ph 7.2 PBS ) 100mg/5mlZOMANBIO