数量： 大量
保质期： 一年
保存条件： ，常温保存，蛋白酶K需要-20℃保存。
规格： 150次
本产品是亚硫酸氢盐DNA修饰试剂盒（CAT#:100922）的升级版，亚硫酸氢盐修饰DNA时要求DNA必须在单链状态，反应还必须在低温进行，常规的修饰试剂盒由于是在液相进行，要在低温下让DNA不相互复性而保持单链状态非常棘手，所以常规修饰试剂盒的修饰效率一般都不高。此外，常规方法要切换反应液，有多次沉淀步骤，使得DNA的回收率一般都不超过50%。为克服这些缺点，本公司开发出了此升级产品，它具有下列特点：1． 用包埋的样品进行所有操作，免去所有沉淀和纯化步骤，极大简化了操作。2． 免去了DNA提取过程，所需实验材料比常规方法更少，*少几个细胞都可以，极大地节约了宝贵材料，尤其适用于珍稀材料。3． 包埋处理后，DNA在整个操作过程中都处于*适于修饰的单链状态，极大提高了修饰效率。4． DNA包埋于包埋块中，切换反应液非常方便，而且DNA不会丢失，所以*终回收率都在90%以上。5． 适用于实体材料、悬浮细胞和纯化好的DNA样品。6. 本试剂盒足够制备150多个10uL包埋块（如果用纯化好的DNA）或25个10uL包埋块（如果用悬浮细胞）。

酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。天净沙DNA甲基化修饰试剂盒传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出，表达量则常常超过大肠杆菌系统，如果实现高效分泌表达，则纯化成本非常低，具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。

天净沙DNA甲基化修饰试剂盒除了用于规模化生产重组蛋白之外，毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用，比如表达蛋白用于结构分析，信号传导途径研究，当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少，一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。

如果需要，完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索，从以往的战绩来看，毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了，天净沙DNA甲基化修饰试剂盒比例也很高，虽然仍存在风险。

1）原核诱导时间，从你的结果来看，诱导1-5小时变化不大，时间点影响较小，取3小时没有问题。很多情况下，温度对可溶性影响较大，不知道你30度诱导的可溶性如何？如果蛋白主要是可溶性的，那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体，天净沙DNA甲基化修饰试剂盒倒是可以再降低一下诱导温度。此外，很多蛋白包含体复性后有活性，如果可溶性表达困难或表达量太低，仍可以考虑包含体复性策略。

2）酵母细胞的破壁可以采用机械法，也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨，主要用于中试和生产，但有的仪器也可以兼顾实验室规模，这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体，是一种外源基因高效转化的方法，天净沙DNA甲基化修饰试剂盒但用于破壁检测表达则成本太高，此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献，是小量裂截用于表达检测的，我没有直接作过，但我们实验室的研究生反映还可以。

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