数量： 大量
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保存条件： -20℃保存
规格： 150U
T4 RNA 连接酶 2 ，也被称为 T4 Rnl-2（ gp24.1 ），同时具有 RNA 链分子间和分子内连接活性。与 T4 RNA 连接酶1不同的是，T4 RNA 连接酶2 对双链 RNA 切刻的连接活性要明显高于对单链 RNA 的末端连接。该酶连接时需要相邻的 3´ 羟基与 5´ 磷酸基。同时该酶也可用于连接双链结构中 RNA 3´ 羟基和 DNA 5´ 磷酸基的切刻 。它具有下列特点：1. 连接粘性末端接头2. 连接双链 RNA 中的切刻*佳用酶3. 可用于 DNA/RNA 杂交链中，RNA 3＇羟基与 DNA 5＇ 磷酸基的连接4. 无单链和双链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 以及磷酸酶的污染。

酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。T4 RNA 连接酶 2 （双链RNA连接酶 ）传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出，表达量则常常超过大肠杆菌系统，如果实现高效分泌表达，则纯化成本非常低，具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。

T4 RNA 连接酶 2 （双链RNA连接酶 ）除了用于规模化生产重组蛋白之外，毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用，比如表达蛋白用于结构分析，信号传导途径研究，当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少，一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。

如果需要，完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索，从以往的战绩来看，毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了，T4 RNA 连接酶 2 （双链RNA连接酶 ）比例也很高，虽然仍存在风险。

1）原核诱导时间，从你的结果来看，诱导1-5小时变化不大，时间点影响较小，取3小时没有问题。很多情况下，温度对可溶性影响较大，不知道你30度诱导的可溶性如何？如果蛋白主要是可溶性的，那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体，T4 RNA 连接酶 2 （双链RNA连接酶 ）倒是可以再降低一下诱导温度。此外，很多蛋白包含体复性后有活性，如果可溶性表达困难或表达量太低，仍可以考虑包含体复性策略。

2）酵母细胞的破壁可以采用机械法，也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨，主要用于中试和生产，但有的仪器也可以兼顾实验室规模，这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体，是一种外源基因高效转化的方法，T4 RNA 连接酶 2 （双链RNA连接酶 ）但用于破壁检测表达则成本太高，此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献，是小量裂截用于表达检测的，我没有直接作过，但我们实验室的研究生反映还可以。

 71206-50 柱式动物DNAout 50次

80923-4 大提柱式动物DNAout 4次

3671-50 血液DNAout 50次

3671-150 血液DNAout 150次

60306-50 柱式血液DNAout 50次

80924-4 大提柱式血液DNAout 4次

80920-1 96孔板血液DNAout 1次

80920-5 96孔板血液DNAout 5次

71002-30 凝固血液DNAout 30次

71002-100 凝固血液DNAout 100次

71204-50 柱式凝固血液DNAout 50次

80805-50 柱式毛发DNAout 50次

91102-50 柱式骨骼DNAout 50次